[發(fā)明專利]一種奈西利肽粗品的固相制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210234405.2
• 申請(qǐng)日: 2012-07-06
• 公開（公告）號(hào): CN102702342A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 白俊才;張國(guó)慶;張若平;方路
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海昂博生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/575
• 分類號(hào): C07K14/575;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 張睿

1.一種奈西利肽粗品的固相制備方法，所述方法包括步驟：

以固相合成樹脂為起始原料，按照固相合成的方法依次連接具有Fmoc保護(hù)基團(tuán)的氨基酸，獲得保護(hù)的三十二肽樹脂，其間依次脫去Fmoc-保護(hù)基團(tuán)，用TBTU/HOBt（即TBTU和HOBt，）、HBTU/HOBt（即HBTU和HOBt）、BOP/HOBt（即BOP和HOBt）、TBTU/HOAt（即TBTU和HOAt）、HBTU/HOAt（即HBTU和HOAt）、DIC/HOBt（即DIC和HOBt）或BOP/HOAt（即BOP和HOAt）中的任何一對(duì)為縮合劑，進(jìn)行接肽反應(yīng)，得保護(hù)的三十二肽樹脂后，同步進(jìn)行脫側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)及切肽，獲得奈西利肽粗品，其特征在于，所述步驟有下述特點(diǎn)：

一是所述固相合成樹脂是溴化王樹脂；及

一是采用DMF/DCM混合溶劑為活化溶劑，預(yù)先溶解具有Fmoc保護(hù)基團(tuán)的氨基酸和縮合劑，反應(yīng)體系外進(jìn)行活化，再加入到反應(yīng)體系中。

2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，依次連接具有Fmoc保護(hù)基團(tuán)的氨基酸包括如下步驟：

(a)將王樹脂、PBr₃、Fmoc-His(Trt)-OH和DIPEA混合，反應(yīng)得到溴化王樹脂；

(b)在溴化王樹脂中，加入脫保護(hù)劑進(jìn)行處理，然后樹脂用DMF洗滌，加入用DMF/DCM混合溶劑溶解的具有Fmoc保護(hù)基團(tuán)的氨基酸、縮合劑的混合物，接肽反應(yīng)后再加入脫保護(hù)劑處理，再加入用DMF/DCM混合溶劑溶解的具有Fmoc保護(hù)基團(tuán)的氨基酸，如此重復(fù)，獲得Fmoc-Ser¹-Pro²-Lys³-Met⁴-Val⁵-Gln⁶-Gly⁷-Ser⁸-Gly⁹-Cys¹⁰-Phe¹¹-Gly¹²-Arg¹³-Lys¹⁴-Met¹⁵-Asp¹⁶-Arg¹⁷-Ile¹⁸-Ser¹⁹-Ser²⁰-Ser²¹-Ser²²-Gly²³-Leu²⁴-Gly²⁵-Cys²⁶-Lys²⁷-Val²⁸-Leu²⁹-Arg³⁰-Arg³¹-His³²-樹脂；

所說(shuō)的具有Fmoc保護(hù)基團(tuán)的氨基酸，依次為：

(1)Fmoc-His(Trt)-OH或Fmoc-His-OH、

(2)Fmoc-Arg(Pbf）-OH或Fmoc-Arg(HCl)-OH、

(3)Fmoc-Arg(Pbf）-OH或Fmoc-Arg(HCl)-OH、

(4)Fmoc-Leu-OH、

(5)Fmoc-Val-OH、

(6)Fmoc-Lys(Boc)-OH、

(7)Fmoc-Cys(Trt)-OH或Fmoc-Cys(Acm)-OH、

(8)Fmoc-Gly-OH、

(9)Fmoc-Leu-OH、

(10)Fmoc-Gly-OH、

(11)Fmoc-Ser(tBu)-OH或Fmoc-Ser-OH、

(12)Fmoc-Ser(tBu)-OH或Fmoc-Ser-OH、、

(13)Fmoc-Ser(tBu)-OH或Fmoc-Ser-OH、、

(14)Fmoc-Ser(tBu)-OH或Fmoc-Ser-OH、、

(15)Fmoc-Ile-OH、

(16)Fmoc-Arg(Pbf)-OH或Fmoc-Arg(HCl)-OH、、

(17)Fmoc-Asp(OtBu)-OH、

(18)Fmoc-Met-OH、

(19)Fmoc-Lys(Boc)-OH、

(20)Fmoc-Arg(Pbf)-OH或Fmoc-Arg(HCl)-OH、

(21)Fmoc-Gly-OH、

(22)Fmoc-Phe-OH、

(23)Fmoc-Cys(Trt)-OH或Fmoc-Cys(Acm)-OH、

(24)Fmoc-Gly-OH、

(25)Fmoc-Ser(tBu)-OH或Fmoc-Ser-OH、

(26)Fmoc-Gly-OH、

(27)Fmoc-Gln(Trt)-OH、

(28)Fmoc-Val-OH、

(29)Fmoc-Met-OH、

(30)Fmoc-Lys(Boc)-OH、

(31)Fmoc-Pro-OH、

(32)Fmoc-Ser(tBu)-OH或Fmoc-Ser-OH。