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[發(fā)明專利]一種透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯新方法有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201210233180.9 申請日: 2012-07-06
公開(公告)號: CN102703322A 公開(公告)日: 2012-10-03
發(fā)明(設(shè)計)人: 歐韋福;劉樹新;黃云兵 申請(專利權(quán))人: 柳州市柳化集團(tuán)大力透明質(zhì)酸有限公司
主分類號: C12N1/00 分類號: C12N1/00
代理公司: 柳州市榮久專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 45113 代理人: 韋微
地址: 545002 廣*** 國省代碼: 廣西;45
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 透明 菌種 復(fù)壯 新方法
【權(quán)利要求書】:

1.一種透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯新方法,其特征在于:包括以下步驟:

(1)復(fù)壯劑的制備:

a1、先取土豆切碎成粒度小于5mm的顆粒狀,然后將土豆和玉米按重量比為3-4:1混合絞碎得到復(fù)壯劑原料,再按1g復(fù)壯劑原料加入1.8-2.2mL水計向復(fù)壯劑原料中加入水,得到混合物;

b1、將步驟a1得到的混合物加熱至沸騰,然后繼續(xù)加熱使混合物保持沸騰2.5-3.5小時,并蒸發(fā)掉混合物體積50%-70%的水,加熱過程每間隔20-30分鐘對物料進(jìn)行攪拌防止發(fā)焦;

c1、在無菌操作臺上用滅菌的濾布過濾得到浸提液,冷卻到常溫備用;?

d1、按羊血與浸提液體積比為2:7-8計把無菌脫纖維綿羊血加入到浸提液中,混合均勻制得復(fù)壯劑,放入2℃-6℃的冰箱內(nèi)保存;

(2)透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯:

a2、配制透明質(zhì)酸固體培養(yǎng)基,高溫滅菌后冷卻至50℃-60℃;

b2、在無菌操作臺上將固體培養(yǎng)基體積12-16%的復(fù)壯劑加入到固體培養(yǎng)基中,搖勻后再倒到平板中冷卻到室溫,得到復(fù)壯平板;

c2、把退化的透明質(zhì)酸菌種斜面或甘油管取出活化25-35分鐘,然后用接種環(huán)挑出退化菌種在復(fù)壯平板上劃線;

d2、把劃好線的復(fù)壯平板放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)30-40小時,直到菌種在平板上出現(xiàn)透明質(zhì)酸單菌落,再用接種環(huán)挑出單菌落進(jìn)行斜面培養(yǎng),培養(yǎng)好后得到復(fù)壯好的菌種放入冰箱進(jìn)行保存。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯新方法,其特征在于:步驟a2所述的固體培養(yǎng)基和步驟d2所述的斜面培養(yǎng)采用的培養(yǎng)基配制如下:先分別稱取腦心浸粉37克、酵母粉10克、葡萄糖1克、七水硫酸鎂2克,然后一起溶解于1000mL水中,溶解完全后調(diào)節(jié)液體pH值到7.2,最后將25克瓊脂剪碎放入配制得到。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯新方法,其特征在于:步驟a2所述的高溫滅菌是在121℃高溫條件下滅菌30分鐘,步驟d2所述的把劃好線的復(fù)壯平板放在35℃-40℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),所述的復(fù)壯好的菌種放入2℃-6℃冰箱進(jìn)行保存。

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1、專利原文基于中國國家知識產(chǎn)權(quán)局專利說明書;

2、支持發(fā)明專利 、實(shí)用新型專利、外觀設(shè)計專利(升級中);

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