[發明專利]從原料乳中分離β-乳球蛋白的方法

無效

• 申請號: 201210231797.7
• 申請日: 2012-07-04
• 公開（公告）號: CN102746395A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發明（設計）人: 劉建新;任大喜;繆淑穎
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/20
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.從原料乳中分離β-乳球蛋白的方法，其特征是包括如下步驟：

1）、將新鮮牛乳于3~5℃經離心和脫脂紗布過濾處理，從而除去乳脂肪，得首次濾液；

2）、首次濾液調節pH至4.5~4.7，室溫下靜置20~40min；得處理后首次濾液；

3）、將處理后首次濾液于3~5℃經離心和脫脂紗布過濾處理，所得的濾液重復上述3~5℃下的離心和脫脂紗布過濾處理，得二次濾液；

4）、二次濾液調節pH至1.9~2.1，得處理后二次濾液；

5）、先按照每1L處理后二次濾液添加65~75g氯化鈉的用量比在二次濾液中加入氯化鈉；然后再調節pH至1.9~2.1，接著室溫下靜置15~25min；

6）、將步驟5）所得物于3~5℃下經離心和脫脂紗布過濾處理，收集濾液；?

7）、先按照每1L濾液添加220~240g氯化鈉的用量比在濾液中加入氯化鈉；然后再調節pH至1.9~2.1，接著室溫下靜置15~25min；

8）、將步驟7）的所得物于室溫下離心，將所得的沉淀溶解于PBS緩沖液或蒸餾水中；

9）、室溫下，將步驟8）所得的溶液用截留分子量10000的濾膜進行超濾2~8小時；所得的截留液經凍干，得凍干β-乳球蛋白粉末。

2.根據權利要求1所述的從原料乳中分離β-乳球蛋白的方法，其特征是：

將凍干β-乳球蛋白粉末進行提純：用C8反相鍵合硅膠色譜柱、以乙睛-水為流動相進行梯度洗脫；分別得A型β-乳球蛋白和B型β-乳球蛋白。

3.根據權利要求1或2所述的從原料乳中分離β-乳球蛋白的方法，其特征是：

所述步驟1）為：將新鮮牛乳以3500~4500g，3~5℃，離心25~35min，4層脫脂紗布過濾；

所述步驟3）為：將處理后首次濾液于3~5℃，4500~5500g下離心15~25?min，4層脫脂紗布過濾；

所述步驟6）為：將步驟5）所得物于3~5℃，8000~12000g下離心15~25min，4層脫脂紗布過濾；

所述步驟8）為：將步驟7）的所得物于室溫下9000~11000g?離心15~25min。

4.根據權利要求3所述的從原料乳中分離β-乳球蛋白的方法，其特征是：

所述步驟2）、步驟4）中均用0.8~1.2?M?的鹽酸調節pH值；

步驟5）和步驟7）均用1.8~2.2M的?鹽酸調節pH值。

5.根據權利要求4所述的從原料乳中分離β-乳球蛋白的方法，其特征是：

所述步驟9）中的凍干為：于-40℃~-50℃下將截留液凍干至恒重。