[發明專利]焦磷酸測序法檢測CYP1B1基因多態性的試劑盒及方法

無效

• 申請號: 201210230456.8
• 申請日: 2012-07-05
• 公開（公告）號: CN102796813A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發明（設計）人: 周宏灝
• 申請（專利權）人: 周宏灝
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 盧宏

1.一種焦磷酸測序發檢測CYP1B1基因多態性的試劑盒，其特征在于，包括如下引物：

（1）擴增引物：

?????上游引物：5’-GCG?CTT?CTC?CAG?CTT?TGT?GCC?T-3’；

?????下游引物：5’-AGG?TCC?TTG?TTG?ATG?AGG?CCA-3’；

其中，下游引物的5’進行生物素標記；

（2）測序引物：5’-GGT?CTG?TGA?ATC?ATG?ACC-3’。

2.一種應用權利要求1所述的試劑盒檢測CYP1B1基因多態性的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）DNA提取；

（2）聚合酶鏈反應：

配制50μl?PCR擴增體系，包含：10×PCR?buffer?5.0μl，dNTP?1.5μl，CYP1B1-上游引物?0.5μl，CYP1B1下游引物0.5μl，rTaq0.5μl，水40μl，模板2μl；循環程序為：95℃5min預變性；依次在95^oC?30S，50^oC?30S，72^oC?30S，進行35個循環；72^oC?保持5min，最終保持在4℃，得擴增產物；

（3）焦磷酸測序單鏈樣本純化；

（4）焦磷酸測序及結果分析。