[發(fā)明專利]一種利用堿蓬細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)脯氨酸的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210229844.4 | 申請日: | 2012-07-05 |
| 公開(公告)號: | CN102719503A | 公開(公告)日: | 2012-10-10 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 李興林;周鑫;韓楊;曹愛佳;崔興華;王丹丹;趙俊;滿淑麗;張黎明;高文遠(yuǎn) | 申請(專利權(quán))人: | 天津科技大學(xué) |
| 主分類號: | C12P13/24 | 分類號: | C12P13/24;C12N5/04;C12N5/02;C12R1/91 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 300457 天津市濱海新區(qū)塘沽經(jīng)濟(jì)*** | 國省代碼: | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 利用 細(xì)胞 懸浮 培養(yǎng) 生產(chǎn) 脯氨酸 方法 | ||
一種利用堿蓬細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)脯氨酸的方法。其特征是:
1.在MS基本培養(yǎng)基+2,4-D0.1~3.5mg/L+6-BA1mg/L和光照條件下以子葉為外植體誘導(dǎo)愈傷組織、繼代培養(yǎng)獲得松散型愈傷組織;在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)制備堿蓬懸浮細(xì)胞體系;繼代培養(yǎng)的最佳接種時間為5~10天和繼代時間為8~16天,獲得分散度較好的細(xì)胞系或小細(xì)胞團(tuán)。
2.利用看護(hù)培養(yǎng)的手段篩選出高產(chǎn)細(xì)胞系。
3.在堿蓬細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的早期添加0.2~1.0%氯化鈉促進(jìn)細(xì)胞生長;在后期添加0.5~2.5%氯化鈉促進(jìn)脯氨酸的積累。
4.對堿蓬細(xì)胞懸浮培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的優(yōu)化,培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件為:MS培養(yǎng)基添加激素為2,4-D0.1~3.5mg/L+6-BA0.5~1.5mg/L,接種量為10~30%,添加碳源和氮源分別為山梨醇和硝酸鉀,搖床轉(zhuǎn)速和培養(yǎng)溫度分別為60~180rpm和20~35℃,光照條件下培養(yǎng)。
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