[發明專利]一個特異追蹤簇毛麥6VS染色體的分子標記及其用法

無效

• 申請號: 201210226122.3
• 申請日: 2012-07-03
• 公開（公告）號: CN102925544A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發明（設計）人: 別同德;何華綱;張伯橋;吳宏亞
• 申請（專利權）人: 江蘇里下河地區農業科學研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一個特異追蹤簇毛麥6VS染色體的分子標記及其用法，其特征在于它是根據普通小麥bin-Map圖譜第6部分同源群短臂的EST序列BG263579為模板設計得到的，標記引物擴增出的一段381bp的DNA條帶位于簇毛麥6VS染色體，可以特異地追蹤6VS染色體及其控制的抗小麥白粉病性狀，標記引物序列為：

6VS-381?F：5’-CCAGTCGGAGAGGATCTCAA-3’

6VS-381?R：5’-TGGGCCTCTTGATCTTGACT-3’。

2.根據權利要求1所述的一個特異追蹤簇毛麥6VS染色體的分子標記及其用法，其使用方法為：(一)PCR反應體系：10μL反應體系中含約10～20ng模板DNA，1×PCR?buffer，1.5mmol?L^-1MgCl₂，200mmol?L^-1dNTP，左右引物終濃度各為0.2μmol?L^-1，0.5U?Taq?DNA聚合酶，用無菌蒸餾水補充反應體系至10μL；(二)PCR反應程序：94℃預變性3分鐘；94℃變性30秒，60℃退火30秒，72℃延伸45秒，32個循環；72℃延伸10分鐘；4℃保存；(三)PCR產物檢測：PCR擴增產物在8％非變性聚丙烯酰胺凝膠上電泳分離，用銀染法染色。

3.根據權利要求1所述的一個特異追蹤簇毛麥6VS染色體的分子標記及其用法，其特征在于它在追蹤以T6AL.6VS易位系為親本的抗小麥白粉病性狀時，凡是擴增出381bp條帶的材料，都含有小麥-簇毛麥T6AL.6VS易位染色體，并對白粉病表現高抗；凡是不能擴增出381bp條帶的材料，都不具有T6AL.6VS易位染色體，相應丟失由6VS染色體控制的白粉病抗性。