[發明專利]青蟹雙順反子病毒檢測用引物組、檢測方法和快速診斷試劑盒有效
| 申請號： | 201210223292.6 | 申請日： | 2012-06-29 |
| 公開（公告）號： | CN102766700A | 公開（公告）日： | 2012-11-07 |
| 發明（設計）人： | 郭志勛;張迪;馮娟;蘇友祿;徐力文 | 申請（專利權）人： | 中國水產科學研究院南海水產研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 廣州知友專利商標代理有限公司 44104 | 代理人： | 宣國華 |
| 地址： | 510300 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 青蟹雙 順反子 病毒 檢測 引物 方法 快速 診斷 試劑盒 | ||
1.一種青蟹雙順反子病毒檢測用引物組，其特征在于該引物組由如下四條引物組成：
內引物FIP，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示；
內引物BIP，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示；
外引物F3，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:3所示；
外引物B3，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:4所示。
2.一種青蟹雙順反子病毒的檢測方法，其特征在于：該方法是利用權利要求1所述的引物組通過LAMP反應和反應后的顯色反應，對待測樣品中是否含有青蟹雙順反子病毒進行檢測。
3.根據權利要求2所述的青蟹雙順反子病毒的檢測方法，其特征在于：LAMP反應的反應體系含有權利要求1中所述的引物組、LAMP反應液、Bst?DNA聚合酶和cDNA。
4.根據權利要求2所述的青蟹雙順反子病毒的檢測方法，其特征在于：所述引物組中內、外引物的摩爾濃度比為2~9:1。
5.根據權利要求2所述的青蟹雙順反子病毒的檢測方法，其特征在于：所述引物組中內、外引物的摩爾濃度比為4:1。
6.根據權利要求2所述的青蟹雙順反子病毒的檢測方法，其特征在于：LAMP反應時的反應溫度為56.2~64.5℃，反應時間為40~70min。
7.根據權利要求2所述的青蟹雙順反子病毒的檢測方法，其特征在于：顯色反應時采用的顯色液為SYBR?Green?I。
8.一種青蟹雙順反子病毒快速診斷試劑盒，其特征在于：該試劑盒包含如下組分：
(1)權利要求1中所述的引物組；
(2)陽性對照品：含有青蟹雙順反子病毒外殼蛋白基因的質粒；
(3)顯色液；
(4)LAMP反應液；
(5)Bst?DNA聚合酶。
9.根據權利要求8所述的青蟹雙順反子病毒快速診斷試劑盒，其特征在于：所述的顯色液為SYBR?Green?I。
10.根據權利要求8所述的青蟹雙順反子病毒快速診斷試劑盒，其特征在于：LAMP反應液含有1×反應緩沖液、0.2~1.8mM?dNTPs、0~1.6M甜菜堿和4~14μMMgSO4。
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