[發明專利]一種高純度替考拉寧的制備方法

有效

• 申請號: 201210221636.X
• 申請日: 2012-06-30
• 公開（公告）號: CN102690333A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 段寶玲;張雪霞;任風芝;董愛華;蔣沁;張志江;李寧;李曉露;王海燕;朱秀良;林毅;陳書紅;成曉迅;李麗紅
• 申請（專利權）人: 華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司
• 主分類號: C07K9/00
• 分類號: C07K9/00;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16
• 代理公司: 石家莊眾志華清知識產權事務所(特殊普通合伙) 13123
• 代理人: 張明月

技術領域

本發明涉及一種工業微生物技術領域中藥品原料的制備方法，尤其是一種從發酵培養物制取的替考拉寧粗品制備高純度替考拉寧的方法。?

背景技術

替考拉寧（Teicoplanin）為游動放線菌屬發酵產生的一種糖肽類抗生素，是繼萬古霉素后開發的新一代糖肽類抗生素，是目前國內臨床上最為看好的抗耐藥抗生素之一，與萬古霉素比較具有更強的脂溶性、半衰期更長，具有良好的體液分布性、藥物不良反應輕，可靜脈或肌肉給藥，應用更方便。?

替考拉寧的作用機制與萬古霉素和其它糖肽類抗生素相似，首先非特異性地與細胞壁的外層結構相結合，然后與細胞壁肽聚糖合成的前體UDP-N-乙酰壁氨酸所接五肽的最后兩個氨基酸形成的二肽D-丙氨酰-D-丙氨酸特異性結合，抑制細胞壁的生物合成，從而阻礙細菌的生長。同時替考拉寧導致細胞內UDP-N-乙酰壁氨酰五肽的積累，對細菌的生長同樣具有抑制作用。替考拉寧主要對革蘭氏陽性的需氧或厭氧球菌具有較強的抗菌活性且耐藥菌株少，臨床上，對皮膚和軟組織感染、敗血癥、腦膜炎、心內膜炎、骨髓炎等深度感染的有效率達80%~90%，同時它與β-內酰胺、氨基糖苷類和碳青霉烯類抗生素聯用，對絕大多數革蘭氏陽性菌有協同殺菌作用。因此，對替考拉寧的研制與開發具有重要的經濟價值和應用前景。?

替考拉寧主要由A_2-1、A_2-2、A_2-3、A_2-4、A_2-5和A_3-16個結構近似的替考拉寧單組份組成。歐洲藥典對各組分比例有明確規定，A₂組之和不小于80.0%，其中A_2-2為35.0%~55.0%，A_2-1、A_2-3、A_2-4、A_2-5均不大于20.0%，A_3-1不大于?15.0%，不純組分不大于5.0%；中國藥典對A₂各組分比例未做規定。?

替考拉寧單組份的結構式?

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中國專利CN?101302248A公開了一種高純度替考拉寧的生產方法，需要對替考拉寧粗品進行凝膠層析、大孔樹脂分離、脫色、超濾、納濾、結晶過程，可得到純度大于93.1%的替考拉寧精粉，但步驟繁瑣，而且只控制A₂組比例，未提及到對A₃和A₂各組分的比例控制。美國專利US2005245481A1公開了一種替考拉寧的生產工藝，對大孔樹脂粗提液進行活性炭脫色、再次樹脂分離、超濾、納濾、結晶，可得到純度大于95%的替考拉寧精粉，但是對于A₂各組分比例不能很好的控制，對于生產符合歐洲藥典標準的替考拉寧精粉具有較高難度。

微球（microsphere）是指藥物分散或被吸附在高分子、聚合物基質中而形成的微粒分散體系。制備微球的載體材料主要為天然高分子微球和合成聚合物微球。其中納米聚合物微球具有剛性大，耐受有機溶劑性能好，pH值的適用范圍廣等優點，其粒徑分布均一、且粒徑可控，在實際的層析分離過程中可以有效避免溝流、壓力不穩定等缺點，此外，它還具有很大的比表面積，最高可達1000?m²/g以上，在高流速下可以獲得更高的分辨率、載量和更低的反壓，因此納米聚合物微球適用于藥物的分離和提純。同葡聚糖凝膠相比較，納米聚合物微球的骨架結構具有更高的機械強度和化學穩定性，可以更適合能經受高流速高壓力操作的液相色譜使用。?

發明內容

本發明需要解決的技術問題是提供一種制備高純度、組分比例可控的替考拉寧精粉的方法，該方法工藝簡單、質量可靠，可生產藥用級替考拉寧原料。?

為解決上述技術問題，本發明所采取的技術方案是：?

一種高純度替考拉寧的制備方法，該方法包括：

步驟1）預處理：將替考拉寧粗品溶解于水或緩沖鹽溶液中，制成替考拉寧粗粉溶液；

步驟2）層析：將替考拉寧粗粉溶液加樣至納米聚合物微球色譜柱進行層析，使用極性溶劑和水的混合溶液梯度解析，分段收集替考拉寧解析液，檢測各段解析液中各單組分的含量，根據對單組分含量的要求合并解析液，得到替考拉寧各單組份符合要求的替考拉寧解析液；