[發明專利]在乳酸乳球菌表面展示表達幽門螺桿菌蛋白的載體及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 201210218423.1
• 申請日: 2012-06-28
• 公開（公告）號: CN102796757A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發明（設計）人: 段廣才;張榮光;程文濱;范清堂;張衛東;郗園林;陳帥印
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: C12N15/74
• 分類號: C12N15/74;C12N1/21;C12N15/66;A61K39/02;A61P31/04;G01N33/68;A23C9/123;A23L1/00;C12R1/01
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 牛愛周

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種可在乳酸乳球菌中表達幽門螺桿菌蛋白、且使表達蛋白展示于菌體表面的表達載體，同時還涉及一種該載體的制備方法與應用。?

背景技術

幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori,H.pylori)是一種革蘭氏陰性致病菌，感染者占世界人口50%以上。幽門螺桿菌感染與人體慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌等疾病的發生、發展密切相關[Kitajima?Y,Ohtaka?K,Mitsuno?M,et?al.Helicobacter?pylori?infection?is?an?independent?risk?factor?for?Runx3?methylation?in?gastric?cancer.Oncol?Rep,2008,19(1):197-202]，防治幽門螺桿菌感染可以降低這些疾病的發病率。由于采用抗生素治療幽門螺桿菌感染容易產生抗藥性，且不能預防重復感染，因此控制幽門螺桿菌感染流行主要寄希望于幽門螺桿菌疫苗的研制成功。幽門螺桿菌定植于人體胃粘膜表面，經口免疫是最合理的免疫途徑。目前，雖有個別幽門螺桿菌疫苗進入臨床試驗的報道，但尚無免疫效果理想的口服疫苗菌株[Zhang?S,Moise?L,Moss?SF.H.pylori?vaccines:why?we?still?don't?have?any.Hum?Vaccin,2011,7(11):1153-7.]。現有研究表明，缺乏安全有效的疫苗載體是影響口服疫苗研究發展的一個關鍵性因素[Agarwal?K,Agarwal?S.Helicobacter?pvlori?vaccine:from?past?to?future.Mayo?Clin?Proc,2008,83(2):169-175.]。?

現有研究多采用減毒傷寒沙門氏菌（Salmonella?typhimurium）作為幽門螺桿菌口服疫苗載體[Xu?C,Li?ZS,Du?YQ,et?al.Construction?of?recombinant?attenuated?Salmonella?typhimurium?DNA?vaccine?expressing?H?pylori?ureB?and?IL-2.World?J?Gastroenterol,2007,13(6):939-944]。由于沙門氏菌是致病菌，減毒株不僅仍具有一定的毒性，而且還存在遺傳穩定性問題，應用于人體時其安全性很難保證[Lee?MH,Roussel?Y,Wilks?M,et?al.Expression?of?Helicobacter?pylori?urease?subunit?B?gene?in?Lactococcus?lactis?MG1363?and?its?use?as?a?vaccine?delivery?system?against?H.?pylori?infection?in?mice.Vaccine,2001,19(28-29):3927-3935]；而且動物實驗顯示以該菌為載體構建的抗幽門螺桿菌疫苗菌株用于免疫小鼠時常引發較嚴重的免疫后胃炎，造成組織損傷。因此，有必要探討更安全有效的口服疫苗載體。?