[發明專利]一種快速測定乳酸菌發酵產物有機酸種類和產量的方法

有效

• 申請號: 201210216725.5
• 申請日: 2012-06-27
• 公開（公告）號: CN102721781A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發明（設計）人: 劉媛媛;汪攀;張軍;王安如
• 申請（專利權）人: 北京大北農科技集團股份有限公司;吉林大北農農牧科技有限責任公司;漳州大北農農牧科技有限公司
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種快速測定乳酸菌發酵產有機酸種類和產量的方法，包括分別制備樣品溶液和標準品溶液，用反相HPLC梯度洗脫法測定乳酸菌發酵產物中有機酸的種類和含量，其特征在于，流動相A液為甲醇，流動相B液為0.01M的磷酸二氫鈉水溶液，0~9.5min為100%B液，9.5~10min?A液升至55%，B液降至45%，10~13min保持55%A液，45%B液，13~15min?A液降至45%，B液升至55%，15~25min保持55%A液，45%B液，25~28min?B液升至100%，28~30min保持100%B液。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的反相HPLC的色譜條件為：色譜柱為C18柱，250mm×4.6mm，5μm，采用低壓梯度洗脫，檢測波長為215nm，柱溫30~40℃，采樣時間為30min。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的柱溫為35℃。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的樣品溶液制備方法為：取乳酸菌發酵液1mL，加入體積分數50%的硫酸200μL，10000r/min離心5min，取上清液100μL稀釋至500μL，經0.45μm濾膜過濾。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的標準品溶液制備方法為：分別取有機酸標準品，加入水配成50mg/mL、100mg/mL或150mg/mL母液備用，使用時混合并稀釋至所需濃度，經0.45μm濾膜過濾。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，梯度洗脫流速0~10min為0.7mL/min，10~30min為1mL/min。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的0.01M磷酸二氫鈉水溶液pH值為2.8~3.0。

8.如權利要求1所述的方法，其特征在于，進樣量為10μL。