[發(fā)明專利]酒糟中可發(fā)酵性淀粉酶水解測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210212260.6
• 申請(qǐng)日: 2012-06-26
• 公開（公告）號(hào): CN102776265A
• 公開（公告）日: 2012-11-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 廖昶;吳生文;劉建文;嚴(yán)偉;陳飛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四特酒有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12Q1/40
• 分類號(hào): C12Q1/40;C12Q1/34
• 代理公司: 南昌新天下專利商標(biāo)代理有限公司 36115
• 代理人: 胡山

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種酒糟中可發(fā)酵性淀粉酶水解測(cè)定方法。

背景技術(shù)

白酒酒糟是釀酒工業(yè)中的主要副產(chǎn)品，如果酒糟不及時(shí)加以處理，就會(huì)腐敗變質(zhì)，不僅浪費(fèi)了寶貴的資源，還會(huì)嚴(yán)重污染周圍環(huán)境，因而充分而有效的對(duì)酒糟加以綜合利用，既可以減輕環(huán)境污染，又可以節(jié)約糧食、降低成本，因此，酒糟的綜合利用對(duì)我國(guó)的資源開發(fā)和環(huán)境保護(hù)具有十分重要的意義。利用酒糟再發(fā)酵生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)白酒，通過技術(shù)手段進(jìn)一步利用酒糟中的可發(fā)酵性淀粉，降低糧耗，實(shí)現(xiàn)資源的循環(huán)利用，節(jié)約成本。酒糟中可發(fā)酵性淀粉的定義：在合適溫度、pH值等的條件下，酒糟中能夠被淀粉酶水解為小分子的糊精或麥芽糖，然后被糖化酶糖化為可發(fā)酵性的糖類，如葡萄糖、果糖等，最后被酵母菌充分利用，發(fā)酵產(chǎn)生酒精和二氧化碳，放出一定生物熱量的淀粉。目前，酒糟中可發(fā)酵性淀粉含量的測(cè)定尚無國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)和企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，所以，酒廠的酒糟都沒有測(cè)定過其中的可發(fā)酵性淀粉含量，不能夠準(zhǔn)確的評(píng)估酒糟的可利用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是提供一種測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，可為酒糟的綜合利用提供理論依據(jù)的酒糟中可發(fā)酵性淀粉酶水解測(cè)定方法。

本發(fā)明的酒糟中可發(fā)酵性淀粉酶水解測(cè)定方法，包括以下步驟：

1、試樣處理：

（1）、液化，每甑各取等量剛出甑的酒糟，相互混合均勻，稱取酒糟樣品質(zhì)量m=50-100g，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，用300ml、85%的乙醇洗去可溶性糖類，濾干乙醇，將殘留物移入500?ml燒杯內(nèi)，并用100ml水洗濾紙，洗液并入燒杯內(nèi)，再加入150?ml水于燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15min，使淀粉糊化，冷卻至60℃以下，加20ml、5g/L的淀粉酶溶液，在55-60℃保溫1h，并同時(shí)攪拌，然后取1滴此液加1滴碘溶液，若顯藍(lán)色，再加熱糊化并加淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止，加熱至沸，冷后移入250?ml三角瓶中，并加水至刻度，混勻；

所述的碘溶液：稱取?3.6g?碘化鉀溶于20m水中，加入1.3?g碘，溶解后加水定容至100ml；

所述的淀粉酶為α-淀粉酶，酶活力大于或等于20,000u/g。

（2）、蒸煮，將裝有已液化酒糟糊的三角瓶用棉塞和防水紙封口后，放入高壓蒸汽滅菌鍋，于壓力0.1MPa保壓1h，取出，冷卻至60℃。

（3）、糖化，用硫酸溶液調(diào)整蒸煮液pH值至4.4-4.7，按每克酒糟加入150u-200u糖化酶，糖化酶的活力大于或等于50,000u/g，當(dāng)糖化酶活力為100000U?/g，酒糟的量為50g時(shí)，加入糖化酶的量為50×200÷100000g=0.1g，攪勻，放入60℃恒溫箱內(nèi)，糖化60min，冷卻至30℃-?35℃。

（4）過濾，糖化液用脫脂棉過濾，濾液用250ml容量瓶接收，用水洗滌殘?jiān)盟ㄈ葜量潭龋瑩u勻。

2、測(cè)定：

（1）、標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液，吸取5.0ml堿性酒石酸銅甲液及5.0ml堿性酒石酸銅乙液，置于150ml錐形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，沸騰時(shí)使溶液均勻，并防止暴沸，從滴定管滴加9ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以每?jī)擅胍坏蔚乃俣壤^續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好退去即為終點(diǎn)，記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積，同法平行操作三份，取其平均值，計(jì)算每10ml（甲乙液各5ml）堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量A（mg）；

所述的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取1g，經(jīng)過98℃～100℃干燥2h的葡萄糖，加水溶解后加入5ml鹽酸，并以水定容至1000ml，此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg葡萄糖。

（2）、試樣溶液預(yù)測(cè)，吸取5.0ml堿性酒石酸銅甲液及5.0ml堿性酒石酸銅乙液，置于150ml錐形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠兩粒，控制在2min內(nèi)加熱至沸，保持沸騰，以先快后慢的速度從滴定管中滴加試樣溶液，待溶液顏色變淺時(shí)，再以每?jī)擅胍坏蔚乃俣鹊味ǎ敝了{(lán)色剛好退去為終點(diǎn)，記錄樣液消耗體積。

（3）、試樣溶液測(cè)定，吸取5.0ml堿性酒石酸銅甲液及5.0?ml堿性酒石酸銅乙液，置于150ml錐形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加比預(yù)測(cè)體積少1ml的試樣溶液至錐形瓶中，并在2min內(nèi)加熱至沸，保持沸騰繼續(xù)以每?jī)擅胍坏蔚乃俣鹊味ǎ敝了{(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄樣液消耗體積，同法平行操作三份，得出平均消耗樣液體積V。