[發明專利]酒糟中可發酵性淀粉酶水解測定方法

有效

• 申請號: 201210212260.6
• 申請日: 2012-06-26
• 公開（公告）號: CN102776265A
• 公開（公告）日: 2012-11-14
• 發明（設計）人: 廖昶;吳生文;劉建文;嚴偉;陳飛
• 申請（專利權）人: 四特酒有限責任公司
• 主分類號: C12Q1/40
• 分類號: C12Q1/40;C12Q1/34
• 代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司 36115
• 代理人: 胡山

1.一種酒糟中可發酵性淀粉酶水解測定方法，其特征在于：它包括以下步驟：

（1）、試樣處理：

（a）、液化，每甑各取等量剛出甑的酒糟，相互混合均勻，稱取酒糟樣品質量m=50-100g，置于放有折疊濾紙的漏斗內，用300ml、85%的乙醇洗去可溶性糖類，濾干乙醇，將殘留物移入500ml燒杯內，并用100ml水洗濾紙，洗液并入燒杯內，再加入150ml水于燒杯內，將燒杯置沸水浴上加熱15min，使淀粉糊化，冷卻至60℃以下，加20ml、5g/L的淀粉酶溶液，在55-60℃保溫1h，并同時攪拌，然后取1滴此液加1滴碘溶液，若顯藍色，再加熱糊化并加淀粉酶溶液，繼續保溫，直至加碘不顯藍色為止，加熱至沸，冷后移入250ml三角瓶中，并加水至刻度，混勻；

（b）、蒸煮，將裝有已液化酒糟糊的三角瓶用棉塞和防水紙封口后，放入高壓蒸汽滅菌鍋，于壓力0.1MPa保壓1h，取出，冷卻至60℃；

（c）、糖化，用硫酸溶液調整蒸煮液pH值至4.4-4.7，按每克酒糟加入150u-200u糖化酶，攪勻，放入60℃恒溫箱內，糖化60min，冷卻至30℃-35℃；

（d）過濾，糖化液用脫脂棉過濾，濾液用250ml容量瓶接收，用水洗滌殘渣，用水定容至刻度，搖勻；

（2）測定：

（a）、標定堿性酒石酸銅溶液，吸取5.0ml堿性酒石酸銅甲液及5.0ml堿性酒石酸銅乙液，置于150ml錐形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加9ml葡萄糖標準溶液，控制在2min內加熱至沸，趁沸以每兩秒一滴的速度繼續滴加葡萄糖標準溶液，直至溶液藍色剛好退去即為終點，記錄消耗葡萄糖標準溶液的總體積，同法平行操作三份，取其平均值，計算每10ml堿性酒石酸銅溶液相當于葡萄糖的質量A；

（b）、試樣溶液預測，吸取5.0ml堿性酒石酸銅甲液及5.0ml堿性酒石酸銅乙液，置于150ml錐形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠兩粒，控制在2min內加熱至沸，保持沸騰，以先快后慢的速度從滴定管中滴加試樣溶液，待溶液顏色變淺時，再以每兩秒一滴的速度滴定，直至藍色剛好退去為終點，記錄樣液消耗體積；

（c）、試樣溶液測定，吸取5.0ml堿性酒石酸銅甲液及5.0ml堿性酒石酸銅乙液，置于150ml錐形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加比預測體積少1ml的試樣溶液至錐形瓶中，并在2min內加熱至沸，保持沸騰繼續以每兩秒一滴的速度滴定，直至藍色剛好褪去為終點，記錄樣液消耗體積，同法平行操作三份，得出平均消耗樣液體積V；?

（3）、結果計算，試樣中葡萄糖的含量

式中：

X-----酒糟中葡萄糖計的含量，單位為克每百克；

A----堿性酒石酸銅溶液相當于葡萄糖的質量；

m------稱取酒糟的質量；

V------測定時平均消耗酒糟溶液的體積；

酒糟中可發酵性淀粉的含量Y﹦X×0.9，式中：

Y------酒糟中可發酵性淀粉的含量，單位為克每百克。

2.如權利要求1所述的酒糟中可發酵性淀粉酶水解測定方法，其特征在于：所述的碘溶液制備方法，稱取?3.6g?碘化鉀溶于20m水中，加入1.3?g碘，溶解后加水定容至100ml。

3.如權利要求1所述的酒糟中可發酵性淀粉酶水解測定方法，其特征在于：所述的淀粉酶為α-淀粉酶，酶活力大于或等于20000u/g。

4.如權利要求1所述的酒糟中可發酵性淀粉酶水解測定方法，其特征在于：糖化酶的活力大于或等于50000u/g。

5.如權利要求1所述的酒糟中可發酵性淀粉酶水解測定方法，其特征在于：所述的葡萄糖標準溶液制備方法，稱取1g，經過98℃～100℃干燥2h的葡萄糖，加水溶解后加入5ml鹽酸，并以水定容至1000ml，此溶液每毫升相當于1.0mg葡萄糖。

6.如權利要求1所述的酒糟中可發酵性淀粉酶水解測定方法，其特征在于：所述的堿性酒石酸銅甲液制備方法，稱15g硫酸銅及0.050g?亞甲藍，溶于水中并定容至1000ml；所述的堿性酒石酸銅乙液制備方法，稱取50g酒石酸鉀鈉、75g氫氧化鈉，溶于水中，完全溶解后，用水定容至?1000ml。