[發(fā)明專利]頭孢拉定分子印跡膜的制備方法和用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210211450.6
• 申請(qǐng)日: 2012-06-20
• 公開（公告）號(hào): CN102731817A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈生榮;于海寧;曾思敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): C08J9/26
• 分類號(hào): C08J9/26;C08J7/16;C08L33/20;B01D71/78;B01D67/00;G01N21/64
• 代理公司: 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.頭孢拉定分子印跡膜的制備方法，其特征是包括以下步驟：

1）、采用相轉(zhuǎn)化法制備聚丙烯腈基膜：

聚丙烯腈干燥處理后與氯化鋰按照4~6：1的重量比一同加入N-甲基吡咯烷酮中，于55~65℃攪拌，待聚丙烯腈與氯化鋰充分溶解后，得溶液；每1g氯化鋰配用25~28ml的?N-甲基吡咯烷酮；

所述溶液經(jīng)過(guò)濾脫泡后于55~65℃靜置1.5~2.5h；然后進(jìn)行刮膜，所得的聚丙烯腈基膜放入去離子水中浸泡30~40h；?

2）、頭孢拉定分子印跡膜的制備：

以頭孢拉定作為模板分子，以甲基丙烯酸作為功能單體，以乙二醇二甲基丙烯酸酯作為交聯(lián)劑；以偶氮二異丁腈作為引發(fā)劑；

在0.5?mmol的頭孢拉定中滴加90~110μl的四丁基氫氧化銨后再加入4.5~5.5ml的甲醇，待頭孢拉定完全溶解后，再加入1~2?g的無(wú)水硫酸鎂攪拌1.5~2.5h；過(guò)濾，得濾液；

在所述濾液中加入甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯和偶氮二異丁腈，均勻攪拌后，得膜液；用于制備濾液的頭孢拉定：甲基丙烯酸：乙二醇二甲基丙烯酸酯=?1:2~6：18~22的摩爾比；每份由0.5?mmol頭孢拉定制備而得的濾液配用35~45?mg的偶氮二異丁腈；

將步驟1）所得浸泡后的聚丙烯腈基膜自然干燥后，得干燥后基膜；將膜液通氮?dú)饷撗酰妹撗鹾竽ひ海粚⒏稍锖蠡は确湃朊撗鹾竽ひ褐薪?.5~2.5h，然后，再真空密封后于55~65?℃聚合45~50h；將經(jīng)上述聚合處理后所得的膜用甲醇和乙酸的混合液洗脫至洗脫液檢測(cè)不出模板分子為止，得頭孢拉定分子印跡膜；?

所述甲醇和乙酸的混合液中，甲醇的體積濃度為88~92%。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的頭孢拉定分子印跡膜的制備方法，其特征是：所述刮膜時(shí)，控制膜的厚度為100~200μm；從而減少膜的溶脹帶來(lái)的影響。

3.如權(quán)利要求1或2所得的頭孢拉定分子印跡膜的用途，其特征是：測(cè)定液態(tài)待測(cè)品中頭孢拉定的濃度。

4.測(cè)定液態(tài)待測(cè)品中頭孢拉定的濃度的方法，其特征是包括以下步驟：

1）、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，依次進(jìn)行以下步驟：

①、將熒光素用pH?5.8的磷酸鹽緩沖液配制成濃度為0.9×10^-6mol/L?~1.1×10^-6mol/L的熒光素溶液；

②、用頭孢拉定、熒光素溶液和用于定容的液體配制一系列的頭孢拉定標(biāo)準(zhǔn)溶液，每10ml的頭孢拉定標(biāo)準(zhǔn)溶液中含有2ml熒光素溶液；

③、采用熒光法，在激發(fā)波長(zhǎng)484nm，發(fā)射波長(zhǎng)512nm處，檢測(cè)所述一系列的頭孢拉定標(biāo)準(zhǔn)溶液熒光值，以頭孢拉定濃度為橫坐標(biāo)，以熒光值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

2）、獲得液態(tài)待測(cè)品中頭孢拉定的濃度，依次進(jìn)行以下步驟：

①、將液態(tài)待測(cè)品濾過(guò)頭孢拉定分子印跡膜；

②、將步驟①所得的頭孢拉定分子印跡膜在室溫下放置22~26h，使液態(tài)待測(cè)品中的頭孢拉定分子被頭孢拉定分子印跡膜充分吸附；

③、用甲醇和乙酸的混合液對(duì)吸附后分子印跡膜進(jìn)行洗脫，得洗脫液，所述甲醇和乙酸的混合液中，甲醇的體積濃度為88~92%；

將洗脫液旋干后加入2ml熒光素溶液，加入用于定容的液體定容至10ml，得待測(cè)液；

④、采用熒光法，將待測(cè)液在激發(fā)波長(zhǎng)484nm，發(fā)射波長(zhǎng)512nm處進(jìn)行檢測(cè)，得熒光值，代入步驟1）的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得待測(cè)液的頭孢拉定濃度；

⑤、按照液態(tài)待測(cè)品與待測(cè)液的體積比，換算獲得液態(tài)待測(cè)品的頭孢拉定濃度。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的液態(tài)測(cè)定待測(cè)品中頭孢拉定的濃度的方法，其特征是：

所述步驟1）中：

配制成頭孢拉定濃度分別為0、0.5、1、2、3、4、5mg/L這一系列的頭孢拉定標(biāo)準(zhǔn)溶液；

所得的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)應(yīng)的公式為Y=20.935X-0.8246，X代表頭孢拉定濃度mg/L，Y代表熒光值。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的液態(tài)測(cè)定待測(cè)品中頭孢拉定的濃度的方法，其特征是：用于定容的液體為去離子水和/或pH?5.8的磷酸鹽緩沖液。