[發明專利]一種以水稻秸稈為主要原料固態發酵產纖維素酶的方法

有效

• 申請號: 201210211315.1
• 申請日: 2012-06-26
• 公開（公告）號: CN103509771B
• 公開（公告）日: 2017-05-17
• 發明（設計）人: 李洪兵;張峰;張明
• 申請（專利權）人: 湖南鴻鷹祥生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N1/14;C12R1/885
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種以水稻秸稈為主要原料固態發酵產纖維素酶的方法，采用的發酵菌株是2012年6月5日保存于中國典型培養物保藏中心的保藏編號為：CCTCC NO：M2012204的里氏木霉(Trichoderma reesei)QZ-5菌株。

2.一種以水稻秸稈為主要原料固態發酵產纖維素酶的方法，其特點是以保藏編號為CCTCC NO：M2012204的里氏木霉(Trichoderma reesei)QZ-5菌株為發酵產纖維素酶菌株，以農產品廢棄物-水稻秸稈為主要原料固態發酵制備纖維素酶，工藝為：

(1)種子培養基：葡萄糖20g/L；馬鈴薯200g/L；

200g/L馬鈴薯的制備：馬鈴薯去皮、切片后，取200g加1.5升水，煮沸20分鐘，沙布過濾取濾液，定容到1升；

(2)接種工藝：取保藏編號為CCTCC NO：M2012204的里氏木霉(Trichoderma reesei)QZ-5斜面菌種一支加入0.9％的生理鹽水10ml，用竹簽刮下培養基上的孢子，即為菌種孢子液，取1ml菌種孢子液放入含50ml種子培養基的250ml的三角瓶中，置于搖床，培養條件：轉速200rpm，溫度28℃，恒溫培養50小時，即為發酵產酶的種子液；

(3)發酵產酶培養基

將水稻秸稈切成1厘米左右的小段，稱20克放入500ml的三角瓶中，加入用醋酸和氫氧化鈉調的溶液酸堿度pH值為4.8的水50ml，121℃滅菌20分鐘，冷卻后待用；

(4)發酵產酶及酶液提取

在滅菌冷卻后的發酵產酶培養基中加入5ml種子培養液并充分混合，28℃環境中靜止培養9天后，再加入200ml水，用棒充分攪散后，將500ml三角瓶置于溫度為28℃轉速為200rpm的搖床上搖3小時，過濾得到酶液；

(5)酶活測定采用國際理論應用化學協會(IUPAC)推薦的國際標準方法即濾紙酶活力FPA測定。