[發(fā)明專利]一種利用重組Bacillus subtilis全細胞轉化AD生成ADD的方法在審

申請?zhí)枺?/td>	201210210431.1	申請日：	2012-06-20
公開（公告）號：	CN102703494A	公開（公告）日：	2012-10-03
發(fā)明（設計）人：	饒志明;許正宏;張溫清;邵明龍;徐美娟;張顯;李會	申請（專利權）人：	江南大學
主分類號：	C12N15/75	分類號：	C12N15/75;C12N1/21;C12P33/02;C12R1/32;C12R1/125
代理公司：	暫無信息	代理人：	暫無信息
地址：	214122 江蘇省***	國省代碼：	江蘇;32
權利要求書：	查看更多	說明書：	查看更多
摘要：
搜索關鍵詞：	一種利用重組 bacillus subtilis 細胞轉化 ad 生成 add 方法
鉆瓜網技術展會專利詞庫專利權人專利榜在售專利公布日期熱門專利

【權利要求書】：

1.一種重組表達載體pMA5-ksdD，其特征是：

通過PCR技術獲得來源于新金色分枝桿菌的KSDD基因，與克隆載體pMD-18T相連，獲得該基因的大量克隆，經雙酶切，片段純化后與表達載體pMA5連接。

2.一種重組枯草芽孢桿菌，其特征是：

將權利要求1中構建的重組載體pMA5-ksdD，用化學轉化法轉化模式菌株Bacillus?subtilis?168，重組枯草芽孢桿菌KSDD酶活較基因來源菌有較大的提高。

3.將權利要求2所述的重組枯草芽孢桿菌全細胞轉化4-AD產ADD的方法，其特征是：將該菌株以1％接種量接種于100mL?LB培養(yǎng)基中，培養(yǎng)24h，離心回收菌體，洗滌兩次，用適當的50mM的Tris-HCl?PH7.0緩沖液復溶，加入0.1％(w/v)4-AD和0.1％(v/v)tween-80，繼續(xù)在30℃，160rpm培養(yǎng)10h。最終底物摩爾轉化率達到65.7％，比新金色分枝桿菌這個出發(fā)菌株的轉化率提高了約20倍。?

下載完整專利技術內容需要扣除積分，VIP會員可以免費下載。

免登錄下載普通用戶下載升級VIP會員，免費下載

該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于江南大學，未經江南大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權和技術合作，請聯(lián)系【客服】

本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201210210431.1/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。