[發(fā)明專利]敲除脯氨酸合成途徑提高鈍齒棒桿菌精氨酸產量的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210210421.8
• 申請日: 2012-06-20
• 公開（公告）號: CN103173466A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發(fā)明（設計）人: 饒志明;許正宏;徐美娟;孫紅梅;竇文芳
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C12N15/10;C12N1/21;C12P13/10;C12R1/15
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種脯氨酸合成關鍵酶缺失型基因ΔproB，其特征是：以保藏編號為CCTCC?NO：M208133的C.crenatum?SYPA菌株DNA為模板，通過重疊PCR法將獲得來自鈍齒棒桿菌SYPA的脯氨酸合成關鍵酶基因proB中的了352個核苷酸堿基缺失；重疊PCR的引物序列為：第一輪PCR引物序列：

PproBF?EcoRI?5’-CGCGAATTCATGCGTGAGCGCATCTCCAACGC

PproBR?SalI?5’-CGCGTCGACTTACGCGCGGCTGGCGTAGTTGGAC

第二輪PCR引物序列：

PΔproB?R?5’-CCCATCCACTAAACTTAAACACGCACGATCACGCTTTCCTGCATC

PΔproB?F?5’-TGTTTAAGTTTAGTGGATGGGGTGTCTGCTGCACGTTTGGCT。

2.一株重組鈍齒棒桿菌SYPA?5-5ΔproB，其特征是將權利要求1所述的缺失ΔproB基因利用電轉化的方法通過同源重組整合至鈍齒棒桿菌SYPA?5-5染色體中獲得。

3.一種利用權利要求2中所述的重組鈍齒棒桿菌發(fā)酵生產精氨酸的方法，其特征在于該菌株的脯氨酸的合成顯著降低，L-精氨酸的產量顯著提高。