[發(fā)明專利]旋毛蟲(chóng)與乳腺癌相關(guān)抗原基因TS498抗體制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210204915.5
• 申請(qǐng)日: 2012-06-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102719441A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-10-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張西臣;李建華;任保彥;宮鵬濤;楊舉;張國(guó)才;張楠;左紹志;李赫;陳玉江
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/12
• 分類號(hào): C12N15/12;C07K16/18;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 吉林長(zhǎng)春新紀(jì)元專利代理有限責(zé)任公司 22100
• 代理人: 陳宏偉

1.?一種旋毛蟲(chóng)與MCF-7乳腺癌細(xì)胞相關(guān)蛋白基因TS498，其特征在于：

其DNA序列如SEQ?No.1所示。

2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的旋毛蟲(chóng)與MCF-7乳腺癌細(xì)胞相關(guān)抗原基因TS498蛋白的抗體制備方法，其特征在于：

分別制備旋毛蟲(chóng)和MCF-7乳腺癌細(xì)胞的抗血清，然后分別利用間接ELISA方法確定腫瘤細(xì)胞抗原與旋毛蟲(chóng)陽(yáng)性血清、旋毛蟲(chóng)抗原與腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性血清間是否存在相關(guān)抗原；利用western?blotting?方法確定與旋毛蟲(chóng)相關(guān)的MCF-7細(xì)胞抗原的分子量大小，并分離相關(guān)蛋白，制備相關(guān)蛋白的抗血清；

然后利用制備的抗血清對(duì)旋毛蟲(chóng)cDNA表達(dá)文庫(kù)進(jìn)行篩選，得到與MCF-7相關(guān)的旋毛蟲(chóng)蛋白基因；

克隆并原核表達(dá)相關(guān)蛋白，純化復(fù)性其原核表達(dá)蛋白作為免疫原免疫小鼠，獲得相關(guān)基因蛋白的抗體；

根據(jù)權(quán)利要求1所述的旋毛蟲(chóng)與MCF-7乳腺癌細(xì)胞相關(guān)蛋白制備方法，其特征在于引物序列為：

上游:??5'-CTCGGGAAGCGCGCCATTGTGTTGGT-3',

下游:??5'-ATACGACTCACTATAGGGCGAATTGGC-3'。

3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的旋毛蟲(chóng)與MCF-7乳腺癌細(xì)胞相關(guān)蛋白制備方法，其特征在利用含特定酶切位點(diǎn)的特異性引物擴(kuò)增TS98基因，引物序列為：

上游：5’-TCCGAATTCATGCAGGGCTATCGCAGTCC-3’，

下游：5’-?GCACTCGAGTCATCTCTTCTGACCAGCCGG?3’。

4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的旋毛蟲(chóng)與MCF-7乳腺癌細(xì)胞相關(guān)抗原基因蛋白在制備治療乳腺癌藥物中的應(yīng)用。