[發明專利]痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑的應用

有效

• 申請號: 201210203125.5
• 申請日: 2012-06-19
• 公開（公告）號: CN103505475A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發明（設計）人: 熊慧
• 申請（專利權）人: 熊慧
• 主分類號: A61K35/74
• 分類號: A61K35/74;A61P15/00;A61P17/12;A61P31/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種痤瘡丙酸桿菌的應用，具體講，涉及痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑在治療制備預防和治療附件炎、子宮頸糜爛、尖銳濕疣、外陰白斑藥物中的應用。

背景技術

痤瘡丙酸桿菌(propionibacterium?acnes，PA)來源于健康人的骨髓，為一種革蘭氏陽性厭氧桿菌，前發現，該菌只存于健康人體，而免疫力低下如腫瘤患者往往分離不到該菌。即使上述人群分離到該菌，其對人體有益的免疫功能幾乎缺失。通過超高壓技術將細菌進行處理后去除無效組分提取有效組分而獲得的一種新型痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑，作為一種非特異性免疫增強劑，在動物實驗研究中，效果明顯，通過對單核巨噬細胞系統強大而持久的刺激作用，提高機體非特異性和特異性免疫反應，使巨噬細胞等免疫細胞殺滅微生物和抗腫瘤作用增強，從而殺滅微生物或惡性腫瘤細胞。

痤瘡丙酸桿菌制劑(propionibacterium?acnes?Product，PAP)，是經甲醛滅活后制成的死菌苗制劑，其制備過程公開在1995版及2000版《中國生物制品規程》。目前應用的該制劑還有法國Merleux研究所生產的滅活菌苗；英國Wellcome藥廠生產的滅活菌苗等。

PAP促進機體免疫反應和抗腫瘤療效已被許多實驗及臨床研究所證實，尤其在消退癌性胸水方面具有獨特療效。PAP抗腫瘤作及抗病原微生物用主要是通過對單核巨噬細胞系統強大而持久的刺激，引起巨噬細胞(Mφ)增生、活化、吞噬功能增強、誘導分泌腫瘤壞死因子(TNF-α)、干擾素(IFN-γ)、白細胞介素(IL-2)、活性氧(H₂O₂、NO)等癌細胞殺傷因子及增強NK細胞殺傷活性，達到抑制和殺傷腫瘤細胞及病原微生物的目的，且可通過促進造血多能干細胞分化為單核巨噬細胞，進一步調動機體免疫系統蘊藏抗癌、殺菌潛力。免疫學的進展加深了人們對免疫系統抗腫瘤功能及免疫治療作用重要性的認識。

目前，PAP可以說是激活Mφ活性最好的制劑之一，但由于PAP為全菌體，體積大，不易進入毛細血管，使其難以發揮全身作用，而且全菌體含大量異種蛋白等致使產品在使用過程中發熱，寒戰等不良反應多見，部分患者可出現較重的肝腎毒性，因此大大限制了其臨床應用。

現代藥理學研究表明，藥物加工到納米水平之后，可顯著提高吸收度、擴散度，有利于降低藥物的某些副作用，提高藥效。通常微生物細胞的破碎技術為機械法、非機械法兩種。機械法包括：高壓勻漿器、高速珠磨機、超聲波震蕩器，非機械法包括化學法、酶解法、滲透壓沖擊法、凍融法和干燥法。雖然細胞破碎的方法很多，但都難以將細胞破碎到粒度均一的納米水平。將藥物加工到其粒度絕大部分都小于100nm從技術角度講難于實現的，并且研究表明，納米級藥物尚存在著用目前的技術難以準確評估的安全性患。

本發明繼續對痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑的功效做了研究，發現了其新的用途。

發明內容

本發明的首要發明目的在于提供痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑(non-cell?propionibacterium?acnes?Product，SPAP)的新用途。

本發明的第二發明目的在于提供該痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑的制備方法。

本發明涉及一種痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑在制備預防和治療附件炎、子宮頸糜爛、尖銳濕疣、外陰白斑藥物中的應用。

本發明的第一優選技術方案為所述的痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑是由粉刺丙酸桿菌經滅活破碎后制備的無細胞制劑。

本發明的第二優選技術方案為所述的痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑是由粉刺丙酸桿菌經后制備的無細胞制劑，粒度為10～1000nm，優選10～800nm，更優選10～500nm。

本發明的第三優選技術方案為所述粉刺丙酸桿菌的菌號為76-27、H-84或77-1，優選77-1。

本發明的第四優選技術方案為所述的痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑的熱原小于320EU/ml，蛋白質的質量百分比含量為6～60％，核酸的質量百分比含量為4～40％，其余為多糖；優選所述的痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑熱原小于120EU/ml，蛋白質的質量百分比含量為20～40％，核酸的質量百分比含量為4～20％，其余為多糖。

為實現本發明的第二發明目的，采用的技術方案為，所述的痤瘡丙酸桿菌無細胞制劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)粉刺丙酸桿菌工作種子批菌種連續2～4次傳代后接種于大瓶或培養罐，在培養基中培養5～10天：

(2)收集無雜菌污染的菌體，加熱煮沸15～60分鐘得到滅活菌液；