[發(fā)明專利]一種秈稻組織培養(yǎng)的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210199024.5 | 申請日: | 2012-06-14 |
| 公開(公告)號: | CN102715084A | 公開(公告)日: | 2012-10-10 |
| 發(fā)明(設計)人: | 付永彩;王超杰;楊亞萍;韓冰;朱穎;李倩倩;孫傳清 | 申請(專利權)人: | 中國農(nóng)業(yè)大學 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢;王慧鳳 |
| 地址: | 100193 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 秈稻 組織培養(yǎng) 方法 | ||
1.秈稻組織培養(yǎng)方法,包括下述步驟:
1)誘導秈稻愈傷組織;
2)對愈傷組織進行繼代培養(yǎng);
3)將經(jīng)過繼代培養(yǎng)的愈傷組織進行分化培養(yǎng);
所述分化培養(yǎng)的培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基添加a-萘乙酸、6-BA和20-40g/L山梨醇的固體培養(yǎng)基。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法,其特征在于:所述分化培養(yǎng)的培養(yǎng)基中的a-萘乙酸添加的終濃度為(0.5-1.2)mg/L,優(yōu)選為1mg/L,所述分化培養(yǎng)的培養(yǎng)基中的6-BA添加的終濃度為(1.8-3.0)mg/L,優(yōu)選為2mg/L;所述分化培養(yǎng)的培養(yǎng)基的pH值為5.8-6.0,優(yōu)選為5.8-5.9。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述繼代培養(yǎng)的培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基添加2,4-D和甘露醇獲得的固體培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權利要求3所述的方法,其特征在于:所述繼代培養(yǎng)的培養(yǎng)基中2,4-D添加的終濃度為1.5-2.5mg/L,優(yōu)選為2mg/L,甘露醇添加的終濃度為35-37g/L,優(yōu)選為36.43g/L,所述繼代培養(yǎng)的培養(yǎng)基pH值為5.8-6,優(yōu)選為5.8-5.9。
5.根據(jù)權利要求1-4中任意一項所述的方法,其特征在于:所述分化培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)的每1L基本培養(yǎng)基均由(1200-1300)mgKNO3、(590-650)mgNH4NO3、(560-590)mg?CaCl2.2H2O、(220-250)mg?MgSO4.7H2O、(130-150)mg?KH2PO4、(27-28)mg?FeSO4.7H2O、(37-38)mgNa2-EDTA.2H2O、(3-3.5)mg?H3BO3、(10-11.5)mg?MnSO4.4H2O、(5.1-6.0)mg?ZnSO4.7H2O、(0.75-0.85)mg?KI、(0.23-0.25)mg?NaMoO4.2H2O、(0.023-0.075)mgCuSO4.5H2O、(0.025-0.03)mg?CoCl2.6H2O、(5-6.5)mg煙酸、(8-10)mg維生素B1、(0.8-1.2)mg維生素B6、(80-100)mg肌醇、(18-22)g麥芽糖、(3-4)g植物凝膠和水組成,用水補足體積;pH值為5.8-6.0;
所述每1L基本培養(yǎng)基優(yōu)選由(1200、1212或1300)mg?KNO3、(590、640或650)mgNH4NO3、(560、588或590)mg?CaCl2.2H2O、(220、247或250)mg?MgSO4.7H2O、(130、136或150)mg?KH2PO4、(27、27.8或28)mg?FeSO4.7H2O、(37、37.3或38)mgNa2-EDTA.2H2O、(3、3.1或3.5)mg?H3BO3、(10、11.15或11.5)mg?MnSO4.4H2O、(5.1、5.76或6.0)mg?ZnSO4.7H2O、(0.75、0.83或0.85)mgKI、(0.23、0.24或0.25)mgNaMoO4.2H2O、(0.023、0.025或0.075)mgCuSO4.5H2O、(0.025、0.028或0.03)mgCoCl2.6H2O、(5、6或6.5)mg煙酸、(8、8.5或10)mg維生素B1、(0.8、1或1.2)mg維生素B6、(80、90或100)mg肌醇、(18、20或22)g麥芽糖、(3、3.5或4)g植物凝膠和水組成,用水補足體積;pH值具體為5.8或6.0。
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