[發(fā)明專利]用于檢測和測定小檗堿的抗體、方法和試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210197148.X
• 申請日: 2012-06-15
• 公開（公告）號: CN103483444A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王慶國;趙琰;屈會化;王雪茜;續(xù)潔琨;張?jiān)?/a>;吳婷婷;孫慧;李翼飛
• 申請（專利權(quán)）人: 北京中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K14/47;C08B37/00;C12N1/16;C07K16/44;G01N33/531;G01N33/577
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1.一種如下通式的免疫原：

其中R是0至6個碳的烷基橋(連接半抗原與載體物質(zhì)的橋)，P是賦予抗原性的載體物質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的免疫原，R＝0，即P₁直接與甘草酸羰基碳原子結(jié)合。

3.根據(jù)權(quán)利要求1的免疫原，R是C1-C6取代或未取代的、直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的亞烷基。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或3的免疫原，R是C1-C4未取代的、直鏈的、飽和的亞烷基。

5.根據(jù)權(quán)利要求1的免疫原，其中載體物質(zhì)為蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、合成或天然多肽或半合成多肽、合成或天然聚合物。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或5的免疫原，其中蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段選自白蛋白、血清蛋白、球蛋白、和脂蛋白。

7.根據(jù)權(quán)利要求1或5的免疫原，其中蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段選自牛血清白蛋白、卵清蛋白、牛丙種球蛋白、甲狀腺素結(jié)合球蛋白、鎖眼形血藍(lán)蛋白(keyhole?limpet?haemocyanin，KLH)等。

8.根據(jù)權(quán)利要求1或5的免疫原，其中合成或天然多肽或半合成多肽是具有足夠數(shù)量的可利用氨基的合成聚氨基酸。

9.根據(jù)權(quán)利要求1或5的免疫原，其中合成或天然聚合物選自碳水化合物、酵母或多糖。

10.抗如權(quán)利要求1至9的免疫原的抗體，其中抗體能與完整的甘草酸中的至少一種結(jié)構(gòu)性抗原決定部位結(jié)合。

11.制備如權(quán)利要求10中的抗體的方法，該方法包括將如權(quán)利要求1至9的免疫原重復(fù)給予動物而使動物免疫，以及從免疫動物中收集所得到的血清抗體；以及利用免疫學(xué)上可接受的細(xì)胞系與產(chǎn)生抗體的免疫動物單克隆細(xì)胞系融合后產(chǎn)生的細(xì)胞系，所制備的單克隆抗體。

12.一種如下結(jié)構(gòu)的偶合物：

其中R是0至6個碳的烷基，P’是不同于P的載體物質(zhì)。

13.如權(quán)利要求12偶合物，其偶合物固定在固相支持物上。

14.根據(jù)權(quán)利要求13的固相支持物可為聚苯乙烯或聚氯乙烯等具有一定吸附作用的材料。

15.根據(jù)權(quán)利要求13或14的固相支持物，優(yōu)選化學(xué)處理高吸附表面的聚苯乙烯酶標(biāo)板。

16.用于檢測和測定樣品中甘草酸的方法，該方法包括將供試樣品和如權(quán)利要求10和11中的抗體一同與如權(quán)利要求12至15中的固定在固相支持物的偶聯(lián)物接觸，再與標(biāo)記二抗接觸，檢測或測定標(biāo)記信號，從校準(zhǔn)曲線中推出樣品中甘草酸的存在或含量。

17.根據(jù)權(quán)利要求16的標(biāo)記二抗，其標(biāo)記試劑選自酶、發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)或它們的混合物。

18.根據(jù)權(quán)利要求16的二抗，標(biāo)記試劑是過氧化物酶。

19.根據(jù)權(quán)利要求16的二抗，標(biāo)記試劑是辣根過氧化物酶(HRP)。

20.根據(jù)權(quán)利要求14或15的偶合物，發(fā)光物質(zhì)是生物發(fā)光物質(zhì)、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)或熒光物質(zhì)。

21.用于檢測和測定甘草酸的試劑盒，該試劑盒包括如權(quán)利要求12至15中任一項(xiàng)的偶聯(lián)物或其混合物，以及如權(quán)利要求10或11的抗體或其混合物。