[發明專利]紅景天注射液的指紋圖譜檢查方法

無效

• 申請號: 201210196940.3
• 申請日: 2012-06-15
• 公開（公告）號: CN102692464A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 曹明光;劉淑麗;張愛平
• 申請（專利權）人: 通化玉圣藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 通化旺維專利商標事務所有限公司 22205
• 代理人: 王偉

1.一種紅景天注射液的指紋圖譜檢查方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）建立紅景天注射液標準物質指紋圖譜；

a、紅景天注射液指紋圖譜標準物質的制備：提取大株紅景天得粉劑；

b、標準物質溶液的制備：

取上述紅景天指紋圖譜標準物質1支，相當于注射液2ml，加水稀釋至10ml，搖勻，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次5ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加注射用水溶解，轉移至5ml量瓶中，用注射用水稀釋至刻度，0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液，即得；

c、供試品溶液的制備：

取紅景天注射液2ml，加水至10ml，搖勻，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次5ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加注射用水溶解，轉移至5ml量瓶中，用注射用水稀釋至刻度，0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液，即得；

d、色譜條件：

采用菲羅門Phenomenex色譜分析柱，流動相為0.07％磷酸溶液、乙腈－甲醇，體積比1：1；檢測波長：278nm；柱溫：30℃，進行梯度洗脫；?

e、測定：

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，紅景天注射液標準物質指紋圖譜與供試品指紋圖譜采用相似度軟件進行評價，相似度不應低于0.95；

（2）以步驟（1）相同的方法建立待測紅景天注射液樣品的指紋圖譜；

（3）將步驟（2）得到的紅景天注射液樣品指紋圖譜與紅景天注射液標準物質指紋圖譜進行相似度評價，篩選符合紅景天注射液標準指紋圖譜要求的樣品。

2.按照權利要求1所述的紅景天注射液的指紋圖譜檢查方法，其特征在于

紅景天注射液指紋圖譜標準物質的制備如下：取大株紅景天1670g，加水煎煮三次，每次加水6倍，煎煮2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.20的清膏，溫度50℃；加乙醇使含醇量達70%，攪勻，冷藏?24小時，溫度5～10℃，濾過，沉淀以5～10℃的少量70%乙醇洗滌一次，濾過，合并濾液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.15～1.20的清膏，溫度50℃；再加乙醇使含醇量達85%，攪勻，冷藏24小時，溫度5～10℃，濾過，沉淀以5～10℃的少量85%乙醇洗滌一次，濾過，合并濾液，調pH值至8.0，?冷藏12小時，溫度5～10℃，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度為1.20～1.30的清膏，溫度50℃，加入注射用水1000ml，冷藏12小時，溫度5～10℃，濾過，濾液調pH值至7.0，加熱煮沸30分鐘，冷藏72小時，溫度5～10℃，濾過，濾液以截留分子量為10000的超濾柱超濾，超濾液加注射液用水定容至1000ml，超濾液加入100g甘露醇，邊攪拌邊加熱，煮沸30min，降至室溫，用0.22μm微孔濾膜過濾，灌封至2ml西林瓶中，每瓶裝2ml，裝好膠塞，放入凍干機中，按規定凍干曲線操做，冷凍結束后，取出壓蓋，即得。

3.按照權利要求1所述的紅景天注射液的指紋圖譜檢查方法，其特征在于紅景天注射液標準物質指紋圖譜應符合下列要求：

供試品指紋圖譜與標準指紋圖譜相似；標準物質指紋圖譜應有18個共有峰；相對保留時間：0.15±10%(1)，?0.20±10%(2)，0.97±10%(3)，1.18±10%(4)，?1.31±10%(5)，?1.42±10%(6)，1.51±10%(7)，?1.61±10%(8)，?1.85±10%(9)，2.01±10%(10)，2.12±10%(11)，2.33±10%(12)，2.44±10%(13)，2.62±10%(14)，2.82±10%?(15)，2.91±10％（16），2.99±10％（17），3.07±10％（18）；非共有峰面積之和不得過總峰面積的15%。

4.按照權利要求1所述的紅景天注射液的指紋圖譜檢查方法，其特征在于以多批次大株紅景天注射液標準物質指紋圖譜生成的綜合對照指紋圖譜為參照，計算多批次注射液指紋圖譜與標準物質指紋圖譜的相似度。

5.按照權利要求1所述的紅景天注射液的指紋圖譜檢查方法，其特征在于以三批大株紅景天注射液標準物質指紋圖譜生成的綜合對照指紋圖譜為參照，計算十批注射液指紋圖譜與標準物質指紋圖譜的相似度；十批注射液與標準物質指紋圖譜的相似度均大于0.98。