[發(fā)明專利]一種β-1,3-1,4-葡聚糖酶及其編碼基因

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210196700.3
• 申請日: 2012-06-15
• 公開（公告）號: CN102719415A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發(fā)明（設計）人: 王金晶;劉曉玲;李崎;李永仙;劉春鳳;鄭飛云
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學
• 主分類號: C12N9/24
• 分類號: C12N9/24;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12R1/19
• 代理公司: 北京匯信合知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11335
• 代理人: 王秀麗

1.一種β-1,3-1,4-葡聚糖酶，其特征在于其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

2.編碼權(quán)利要求1所述β-1,3-1,4-葡聚糖酶的基因，其特征在于其核苷酸序列如SEQ?IDNO.2所示。

3.表達權(quán)利要求1所述β-1,3-1,4-葡聚糖酶的基因工程菌或細胞系。

4.含有權(quán)利要求2所述β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的表達載體或克隆載體。

5.生產(chǎn)權(quán)利要求1所述β-1,3-1,4-葡聚糖酶的方法，其特征在于包括如下步驟：

1）采用化學全合成或PCR方法獲得SEQ?ID?NO.2所示核苷酸序列；

2）克隆SEQ?ID?NO.2所示核苷酸序列到pET28a(+)表達載體；

3）將步驟2）獲得的表達載體轉(zhuǎn)化E.coli?BL21(DE3)獲得表達β-1,3-1,4-葡聚糖酶的基因工程菌；

4）將步驟3）獲得的基因工程菌在LB培養(yǎng)基中37℃液體培養(yǎng)過夜，后接入TB發(fā)酵液體培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)2h后用4mg/L?IPTG及終濃為10mmol/L乳糖誘導，降溫至25℃培養(yǎng)，24h時離心獲得上清酶液。