[發明專利]一種固相片段法合成比伐盧定的方法

有效

• 申請號: 201210196621.2
• 申請日: 2012-06-14
• 公開（公告）號: CN102731624A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 姚程成;楊毅躍;康國偉;蒙相鋒
• 申請（專利權）人: 無錫市凱利藥業有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種固相片段法合成多肽的方法，尤其是比伐盧定的固相片段法合成方法。

背景技術

比伐盧定(Bivalirudin)，是一種近年來應用于臨床直接的、特異的、可抑性凝血酶抑制劑，其有效抗凝成分為水蛭素衍生物片段，可以直接通過特異性抑制凝血酶活性而發揮抗凝作用，作用可逆而短暫。早期的臨床研究顯示：比伐盧定抗凝治療效果確切，且出血事件的發生率較低，和傳統肝素抗凝治療相比使用更為安全。佛羅里達奧克拉心臟病研究所的Bittl自己主持的一項研究顯示，在不穩定型心絞痛及梗塞后心絞痛患者行冠狀動脈成形術過程中，比伐盧定的效果比肝素好，比伐盧定組患者術后7天的總終點事件(死亡、血管再通術及心肌梗死)發生率少于肝素組(6.2％vs7.9％，P＝0.039)，出血副作用發生率亦更低(3.5％vs?9.3％，P＜0.001)。2000年12月美國食品藥物管理局(FDA)批準比伐盧定在美國上市。美國胸科醫師學會(ACCP)抗栓和溶栓治療循證指南和美國心臟學會和心臟病學會2005年于PCI患者抗凝治療指南指出，比伐盧定克服了肝素、低分子肝素及水蛭素的缺點，具有良好的臨床應用前景。可替代肝素用于PCI、不穩定型心絞痛、急性心肌梗死溶栓的治療，肝素誘導的血小板減少癥的抗栓治療；也可以用于外周動脈介入治療、心肺移植手術及腎功能不全患者防栓抗栓治療亦有良好作用，所以可作為普通肝素和IIb/1IIa受體阻滯劑的替代藥和輔助藥物。

2007年全球銷售達2.55億美元，目前市場應用正在不斷擴大。然而，比伐盧定在我國尚未上市，MedicineS公司也沒有在亞洲地區的上市計劃，這在很大程度上延誤了我國心血管醫療事業一尤其是冠狀動脈血管成形術的發展。實現比伐盧定的規模化和產業化生產，能夠很好地促進比伐盧定藥物在我國醫療事業的應用，提高心臟手術的醫療水平。

比伐盧定化學式為：

D-Phe-Pro-Arg-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-OH

目前國內關于比伐盧定合成報道的不多，其中專利號CN200910028793，提供一種比伐盧定的液相合成方法，這個方案主要是通過液相合成三個全保護的片段：N-端全保護的6肽、中段全保護的6肽、C-端全保護的8肽，然后將這三個片段依次在液相中依次縮合得到全保護的比伐盧定。該方案在規模化生產中產生大量的廢液，產品也比較難純化。上述方案工藝比較繁瑣，而且產生的雜質多，產品純度也比較低，不易進行大規模化生產。

發明內容

本發明提供了一種高收率、提成本、反應條件溫和、環境污染小、有利于實現產業化的比伐盧定固相片段法合成工藝。

為了實現上述目標，本發明方案主要包括以下步驟：

1)由替代度為0.4～0.9mmol/g的Wang?Resin和Fmoc-Leu-OH反應制備Fmoc-Leu-Wang?Resin，再按序列依次連接12個含Fmoc保護基氨基酸，得13肽片段I-Wang?Resin；

2)由替代度為0.4～0.9mmol/g的Wang?Resin和Fmoc-Gly-OH反應制備Fmoc-Gly-Wang?Resin，再按序列依次連接6個含Fmoc保護基氨基酸，得7肽片段-2-Chlorotrityl?Chloride?Resin，裂解得Fmoc保護N端的7肽片段II；

3)13肽片段I-Wang?Resin與7肽片段II以固相片段法合成比伐盧定-Wang?Resin，經脫保護，裂解，純化冷凍干燥得比伐盧定。