[發明專利]一種ɑ-1，3半乳糖基轉移酶融合蛋白及制備方法有效
| 申請號： | 201210195131.0 | 申請日： | 2012-06-13 |
| 公開（公告）號： | CN102703399A | 公開（公告）日： | 2012-10-03 |
| 發明（設計）人： | 蔡傳奇;郭海軍;閆宇鵬;云升;王云虹 | 申請（專利權）人： | 北京京蒙高科干細胞技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/10 | 分類號： | C12N9/10;C12N1/21;C12N15/62;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人： | 馮瓊;李玉秋 |
| 地址： | 100085 北京市海淀區*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 半乳糖 轉移酶 融合 蛋白 制備 方法 | ||
1.一種融合蛋白，其特征在于，由TRX蛋白與ɑ-1，3半乳糖基轉移酶融合形成，具有催化ɑ-半乳糖表位形成活性。
2.根據權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述ɑ-1，3半乳糖基轉移酶包括其催化結構功能域α1,3GTcd部分。
3.根據權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述ɑ-1，3半乳糖基轉移酶還包括用于純化的序列。
4.根據權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述用于純化的序列為GST或His-tag結構域。
5.根據權利要求1-4任一項所述的融合蛋白，其特征在于：其為可溶狀態。
6.根據權利要求1-4任一項所述的融合蛋白，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ?ID?No.3所示。
7.產生根據權利要求1-6任一項所述融合蛋白的細菌。
8.根據權利要求7所述的細菌，其特征在于，其為大腸桿菌DH5α或大腸桿菌BL21（DE3）。
9.一種生產權利要求1至6任一項所述融合蛋白的方法。
10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：制備包含ɑ-1，3半乳糖基轉移酶基因與TRX基因的重組DNA，將所述重組DNA分子轉化受體細胞，培養獲得ɑ-1，3半乳糖基轉移酶的融合蛋白。
11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于：所述重組DNA包括用于純化的DNA序列部分。
12.根據權利要求10所述的方法，其特征在于：具體步驟為：
步驟1、以如SEQ?ID?No.1所示序列為模板進行PCR擴增，其上游引物序列如SEQ?ID?No.4所示；下游引物序列如SEQ?ID?No.5所示;
步驟2：將PCR產物與pET-32a質粒載體用KpnI及XhoI兩種限制性內切酶的作用下酶切；
步驟3：在T4DNA連接酶的作用下，連接載體與基因；將連接產物轉化感受態細菌，培養獲得ɑ-1，3半乳糖基轉移酶的融合蛋白。
13.根據權利要求12所述的方法，其特征在于：所述細菌為大腸?桿菌DH5α或大腸桿菌BL21（DE3）。?
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于北京京蒙高科干細胞技術有限公司，未經北京京蒙高科干細胞技術有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201210195131.0/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：長絲分束二軸系展絲器及應用
- 下一篇：高產纖維素酶的酵母菌株及其篩選方法
