[發明專利]結合EGFR家族蛋白的嵌合抗原受體、其組合物及用途

有效

• 申請號: 201210191472.0
• 申請日: 2012-06-12
• 公開（公告）號: CN103483453B
• 公開（公告）日: 2018-08-31
• 發明（設計）人: 錢其軍;金華君;丁娜;俞德超;李林芳;吳孟超
• 申請（專利權）人: 上海細胞治療工程技術研究中心集團有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/11;C12N15/63;C12N5/10;A61K38/16;A61K48/00;A61P35/00;A61P31/12
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 劉海羅

本發明屬于分子生物學和免疫學領域，涉及一種結合EGFR家族蛋白的嵌合抗原受體、其組合物及用途。具體地，本發明涉及一種嵌合抗原受體，包含高效結合EGFR家族蛋白的多肽以及跨膜區，其中，所述高效結合EGFR家族蛋白的多肽包含HERIN。本發明在維持T細胞殺傷特異性的前提下，提高了T細胞的增殖能力與殺傷作用。

技術領域

本發明屬于分子生物學和免疫學領域，涉及一種結合EGFR家族蛋白的嵌合抗原受體、其組合物及用途。

背景技術

腫瘤過繼細胞治療（adoptive cell therapy,ACT）是將經處理的自體或異體免疫細胞（主要是自體細胞）回輸給腫瘤患者，以增強患者免疫功能，達到治療目的的方法。當前腫瘤ACT進展迅速，利用腫瘤浸潤淋巴細胞（tumor-infiltrating lymphocyte,TIL）開展的過繼免疫治療方案針對黑色素瘤取得了非常好的臨床效果（Science2002;298:850-4）。然而，T細胞活化需要兩個信號的刺激，即兩種T細胞活化相關信號。其中，T細胞表面TCR-CD3復合體與抗原肽-MHC分子結合，提供T細胞活化的第一信號，決定T細胞的殺傷特異性；T細胞表面的共刺激分子（如CD28）與相應配體（如B7）結合，提供T細胞活化的第二信號，促進T細胞活化、增殖與存活。但腫瘤細胞第一信號刺激源（如MHC分子）與第二信號配體（如B7）等缺乏或表達下降，無法有效提供T細胞活化相關的信號，從而激活T細胞免疫反應。因而，需要對T細胞進行基因改造。目前主要通過轉基因TCR（T cell receptor）及嵌合抗原受體（chimeric antigen receptors,CAR）兩種方式來實現這種T細胞的基因改造（Blood 2010;116:1035-44；Nat Rev Clin Oncol 2011;8:577-85）。

TCR改造具有比較大的限制性，①轉基因TCR鏈可能與病人的內源性的TCR鏈發生錯配，從而導致T細胞表面腫瘤反應性的TCR密度減少；②TCR識別MHC分子遞呈的抗原，但不同的病人MHC分子是不同的，所以必須分離對所有MHC單體型特異的TCR，可操作性低；③大部分TCR不能識別糖類或糖脂類抗原，抗原選擇范圍較窄；④只提供T細胞活化相關的第一信號，沒有提供第二信號，療效不足。因而，嵌合抗原受體CAR受體受到更多的青睞。

嵌合抗原受體（CAR）由一個scFv單鏈抗體（由抗體VL區氨基酸序列和VH區氨基酸序列經Linker連接而成），通過鉸鏈結構與源于TCR復合體或者IgE高親和受體的跨膜和胞內信號結構連接構成。表達CAR的T細胞可通過非MHC限制性途徑與抗原反應。此外，與常規的TCR只能針對的蛋白抗原相比，CAR并不局限于蛋白抗原，還包括糖類和糖脂類TAA，而這些抗原不像蛋白抗原那么容易突變（Curr Opin Immunol 2009;21:215-23；Blood 2010;116:1035-44；Cancer Res2011;71:3175-81；J Cancer 2011;2:378-82）。

自1989年，由Eshhar和其同事首次提出CAR的概念以來，其已經歷了三個不同的發展階段。

第一代CAR，包含胞外特異識別腫瘤抗原的scFv片段，胞內激活信號由CD3ζ或FcεRIγ的ITAM（immunoreceptor tyros ine-based activation motifs）信號鏈來傳遞。但是第一代CAR受體缺乏T細胞的共刺激信號，導致T細胞只能發揮瞬間效應，在體內存在時間短、細胞因子分泌少。