[發(fā)明專利]黃瓜果實苦味基因Bt緊密連鎖的SSR標記及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210185989.9 | 申請日： | 2012-06-06 |
| 公開（公告）號： | CN102690823A | 公開（公告）日： | 2012-09-26 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 顧興芳;張圣平;苗晗;王燁 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12Q1/68;A01H1/04 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129 | 代理人： | 張濤 |
| 地址： | 100081 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 黃瓜 果實 苦味 基因 bt 緊密 連鎖 ssr 標記 及其 應(yīng)用 | ||
1.黃瓜果實苦味基因Bt緊密連鎖的SSR標記，序列如下：
SSR21558-F/SSR21558-R:
GTGGGGGATGTGATTCAGAC/CATCATCCATTCCCCTCAAC，其擴增的特征條帶如Seq?ID?No.1所示和Seq?ID?No.2所示，
SSR20054-F/SSR20054-R:GTTTGTGAGGGAAACGCAAT/TCAAAAAGCTTCCTTCCTTCA，其擴增的特征條帶如Seq?ID?No.3和Seq?ID?No.4所示。
2.權(quán)利要求1所述的SSR標記在選擇無果實苦味基因Bt的黃瓜種質(zhì)資源中的應(yīng)用，其步驟如下：
（1）采用所述SSR標記為引物對黃瓜待選材料的基因組DNA分別進行PCR擴增，
（2）對擴增結(jié)果進行凝膠電泳檢測，
（3）從凝膠電泳檢測的結(jié)果中選出沒有出現(xiàn)所述果實苦味特征條帶的材料。
3.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的應(yīng)用，所述PCR擴增的體系：GoTaq?GreenMasterMix5μL（PromeGa），15nGDNA，正向、反向引物各30nG，其余以ddH2O補足至10μL。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的應(yīng)用，PCR擴增的程序為：94℃預(yù)變性4min；94℃變性15s；55℃退火15s；72℃延伸30s；35個循環(huán)；72℃保溫5min。
5.根據(jù)權(quán)利要求2～4任一所述的應(yīng)用，所述凝膠電泳檢測指采用6％的非變性聚丙烯酰胺凝膠，于160V恒電壓電泳分離，最后銀染顯色。
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