[發明專利]一種丹紅注射液質量控制方法

有效

• 申請號: 201210184920.4
• 申請日: 2012-06-03
• 公開（公告）號: CN102692462A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 吳永江;劉雪松;吳增增;楊凱;丁海櫻;金葉;萬新民;蘇曉濤;劉象銀;陸世海;王臣臣;王振華
• 申請（專利權）人: 浙江大學;菏澤步長制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高;趙杭麗

技術領域

本發明涉及一種中藥復方制劑丹紅注射液質量控制方法，具體地說是用指紋圖譜結合高效液相色譜（HPLC）多指標成分含量測定的方法來控制丹紅注射液的質量。

背景技術

丹紅注射液系由丹參、紅花兩味藥材經提取、濃縮、醇沉、水沉、制劑等工藝制成的中藥注射劑，主要用于治療心絞痛、心肌梗塞、動脈粥樣硬化等心腦血管疾病。其具有起效快、療效好等功效，目前已廣泛應用于臨床。但由于原藥材質量不均、工況波動等因素，常導致產品批次間差異，難以實現丹紅注射液質量穩定、均一可控的目標。因此，如何建立一種較綜合、全面的丹紅注射液質量評價方法，從而保證產品質量的進一步升級，顯得十分重要。

現行《部頒》標準對丹紅注射液質量評價除常規制劑檢查項目外，含量測定項只要求總黃酮和注射劑中丹參素鈉和原兒茶醛等幾個指標成分。總黃酮含量測定采用亞硝酸鈉——硝酸鋁顯色法，而注射液中酚酸類化合物，如丹參素鈉、原兒茶醛、丹酚酸B等均對該顯色方法有響應，方法專屬性不強，無法真實反映注射液中主要藥效群體含量。此外，丹紅注射液液相含量測定也只針對其中丹參素鈉、原兒茶醛等一兩個化學成分進行表征和控制。然而，中藥往往是由眾多化學組分所組成的復雜物質體系，傳統的測定一個或幾個化學成分含量的方法無法對中藥質量做出整體分析。

以指紋圖譜作為中藥提取物及其制劑的質量控制方法，目前已成為國際共識。美國食品藥品管理局（FDA）允許中草藥保健品申報資料中提供色譜指紋圖譜；世界衛生組織（WHO）在1996年草藥評價指導原則中也規定，如果草藥的活性成分不明確，可以提供色譜指紋圖譜以證明產品質量一致；歐共體（EU）在草藥質量指南中亦稱，單靠某種有效成分考察質量的穩定性是不夠的，因為草藥及其制劑是以整體為活性物質。2001年，國家藥品監督管理局頒布《中藥注射液及指紋圖譜研究的技術要求》（暫行）要求將指紋圖譜檢測指標及技術要求作為質量標準的單列項目，從而對中藥質量控制方法進行了有益補充。中藥指紋圖譜的建立不僅能較為全面地反映中藥及其制劑中所含化學成分的種類和數量，進而對藥品質量進行整體描述和評價，同時，對于提高中藥質量，促進中藥現代化具有重要意義。

目前，中藥指紋圖譜研究比較主流的方法是色譜法包括薄層色譜法、液相色譜法、氣相色譜法等。薄層色譜由于重現性及精密度差，主要用于中藥的鑒別；氣相色譜主要用于分析易揮發性化學成分中藥；而液相色譜由于其分析效能高、重現性好、靈敏度高等特點在中藥指紋圖譜中得到最為廣泛的應用。特別是近年來，多種技術的聯用，更是使指紋圖譜的分析手段從單維走向多維。多維的指紋圖譜分析技術主要有HPLC/MS/MS和HPLC/DAD，HPLC/MS/MS因價格昂貴，在中藥質量控制中推廣尚存在一定困難；而HPLC/DAD不僅簡單，易于普及，同時能夠盡可能多的提供中藥色譜和光譜信息，十分適合于指紋圖譜分析。

在實際應用領域，指紋圖譜作為一種綜合、全面的質量控制技術已有相關專利，如（CN102323345.2，CN201110073973.4，CN201110072539.4，CN201010108838.4）。目前，指紋圖譜定性相似度主要采用夾角余弦算法，該法的原理是將每個樣品指紋圖譜看做一個向量計算供試品指紋向量和對照指紋向量之間的夾角余弦值，但該法不具有定量性質，同時存在著大峰掩蓋小峰問題；程翼宇等（程翼宇等，化學學報，2002，60(17)：2018）提出采用相關系數法，其公式為相關系數法可以從整體上判斷指紋圖譜的相似度，但該法經常存在對樣品不敏感，計算結果相似度偏高的問題；孫國祥（孫國祥等，藥學學報，2007，42(1)：75）在此基礎上提出了一種更為優秀的評價方法，即對對照指紋圖譜作樣品作計算與間夾角余弦值，該方法的優點在于能夠消除大峰的影響，對各峰具有等權性。定量相似度方面，孫國祥等也提出了一種計算定量相似度P(P=S_F·R，其中R為樣品與對照指紋圖譜共有指紋峰總積分面積之間的比值；S_F為夾角余弦值)的方法。該法在用于評價指紋圖譜定量相似度時，雖然考慮了不同組分的比例，但只在S_F較低時影響明顯。定量相似度其中為樣品與對照指紋圖譜中第i個特征峰的積分面面積之間的比值)則將每個共有峰看作相對獨立的整體，通過計算樣品全部共有峰與對照指紋圖譜特征峰接近程度，是一種更為優秀的比較方法。