[發明專利]一種丹紅注射液質量控制方法

有效

• 申請號: 201210184920.4
• 申請日: 2012-06-03
• 公開（公告）號: CN102692462A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 吳永江;劉雪松;吳增增;楊凱;丁海櫻;金葉;萬新民;蘇曉濤;劉象銀;陸世海;王臣臣;王振華
• 申請（專利權）人: 浙江大學;菏澤步長制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高;趙杭麗

1.?一種丹紅注射液質量控制方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）丹紅注射液HPLC指紋圖譜的建立和測定

①丹紅注射液對照樣品溶液的制備：

精密移取丹紅注射液2?mL，置于10?mL量瓶中，用體積比為50:50的乙腈-0.5%甲酸溶液定容至刻度，搖勻，經0.45?μm的微孔濾膜濾過，即得；

②丹紅注射液成品指紋圖譜的測定：

精密吸取供試品溶液注入高效液相色譜儀，測定，得到丹紅注射液對照指紋圖譜，色譜條件：十八烷基硅烷鍵和硅膠為填料，梯度洗脫，流速0.5~1.5?mL/min；流動相：A為0.5%甲酸水溶液，B為乙腈；采用程序可變波長掃描；柱溫20~40?℃；

（2）丹紅注射液HPLC多指標含量測定方法的建立和測定

①丹紅注射液對照樣品溶液的制備：

精密稱取丹參素鈉、原兒茶醛、咖啡酸、阿魏酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A適量，置于量瓶中，用體積比為50:50的乙腈-0.5%甲酸溶液定容至刻度，搖勻，過濾，即得對照品溶液；

②丹紅注射液供試品溶液的制備：

精密移取丹紅注射液2?mL，置于10?mL量瓶中，用體積比為50:50的乙腈-0.5%甲酸溶液定容至刻度，搖勻，經0.45?μm的微孔濾膜濾過，即得；

③丹紅注射液供試品溶液的測定：

精密吸取供試品溶液注入高效液相色譜儀，測定，得到丹紅注射液中丹參素鈉、原兒茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A含量，色譜條件：十八烷基硅烷鍵和硅膠為填料，梯度洗脫，流速0.5~1.5?mL/min；流動相：A為0.5%甲酸水溶液，B為乙腈；采用程序可變波長掃描；柱溫20~40?℃；

（3）將所述的待測產品的指紋圖譜與HPLC含量測定結果結合，綜合評價注射液產品質量；

采用matlab7.11.0對得到的指紋圖譜數據進行處理，計算不同批次樣品指紋圖譜與對照指紋圖譜之間的夾角余弦、相關系數、比率定性相似度以及定量相似度，同時，測定丹紅注射液中以丹參素為主的8種有效成分含量，根據結果對注射液質量做出評價；

步驟（1）、（2）中所述的色譜條件為：Agilent?Zorbax?C₁₈，5?μm，10?mm????????????????????????????????????????????????4.6?mm；流動相A為0.5%甲酸水溶液，流動相B為乙腈，柱溫35?℃，梯度洗脫程序為：0-15?min，98%-90%?A；15-20?min，90%-83%?A；20-45?min，83%-72%?A；45-48?min，72%-40%?A；程序可變波長掃描條件為：0-18?min，280?nm；19-48?min，326?nm。

2.根據權利要求1所述的一種丹紅注射液質量控制方法，其特征在于：所述的步驟（1）中指紋圖譜方法應用于丹紅注射液成品定性相似度測定中的19個共有特征峰，其峰面積之和占總峰面積90%以上，其中2號峰丹參素鈉為參照峰。

3.根據權利要求1所述的一種丹紅注射液質量控制方法，其特征在于：步驟（3）所述的指紋圖譜定性相似度計算采用夾角余弦S_F、比率定性相似度及相關系數綜合評價，計算P、M值得到定量相似度。

4.根據權利要求3所述的一種丹紅注射液質量控制方法，其特征在于：所述的定量相似度P值的計算公式為，其中S_F為夾角余弦值，R為樣品指紋圖譜共有指紋峰總積分面積與對照指紋圖譜的共有指紋峰總積分面積的比值；定量相似度M值的計算公式為，其中n為共有峰數量，樣品與對照指紋圖譜中第i個特征峰的積分面面積之間的比值。

5.根據權利要求3所述的一種丹紅注射液質量控制方法，其特征在于：所述的指紋圖譜相似度計算采用Matlab7.11.0進行數據處理。

6.根據權利要求1所述的一種丹紅注射液質量控制方法，其特征在于：所述的步驟（3）中HPLC含量測定結果中丹參素鈉、原兒茶醛的含量總和大于0.35?mg/mL，夾角余弦、相關系數、比率定性相似度均大于0.95，定量相似度P在0.80~1.20之間，則認為所述的丹紅注射液待測產品的質量合格。