[發明專利]防治桃小食心蟲的白僵菌制劑及其制備方法

無效

• 申請號: 201210184231.3
• 申請日: 2012-06-06
• 公開（公告）號: CN102690760A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 熊琦;高英;張艷峰;李捷;范仁俊;曹天文;謝映平;薛皎亮
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01N25/12;A01P7/04;A01G13/00;C12R1/645
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 楊耀田

1.一種白僵菌，其菌種保藏號為CGMCCNo.4526。

2.一種防治桃小食心蟲的白僵菌制劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)一級斜面菌種培養：將保藏號為CGMCC?No.4526的球孢白僵菌菌種接入裝有含健康桃小食心蟲蟲尸浸出液的PDA斜面培養基的試管中，放入培養箱，在溫度為20℃-28℃、相對濕度為70％-85％條件下培養，待菌絲長滿斜面并產滿孢子時備用；

(2)二級菌種培養：在無菌條件下，將培養好的一級斜面菌種連同培養基一起刮下，放入含有液體培養基的三角瓶中培養，接種量為每一試管菌種接種3瓶，將接種后的三角瓶放入恒溫震蕩培養箱，20℃-28℃、150-200r/min，培養至培養液中長滿菌絲球時備用；

(3)三級固體擴大培養：在無菌條件下，將二級菌種，按體積比為1∶10-25的接種量接入滅過菌的固體培養基中，在溫度為20℃-28℃、相對濕度為70％-85％條件下培養，至培養基上長滿白色菌絲，即得三級培養物；

(4)菌粉制劑制備：將原料按重量百分比計麥麩60-80，谷殼20-40（優選：麥麩70，谷殼30）混勻，并按原料總重量加水60％-80％攪拌均勻，滅菌，冷卻至室溫后，即得填料；將填料與三級培養物按1-3∶1比例在無菌室內攪拌均勻，分裝，即得白僵菌菌粉制劑；

所述的液體培養基為SDAY培養基；

所述的固體培養基通過如下方法制得：按重量百分比計，將原料麥麩68-72，谷殼26-30，奶粉1-4混勻，并加入原料總重量60％-80％的水，攪拌均勻，滅菌制得。

3.如權利要求2所述的一種防治桃小食心蟲的白僵菌制劑的制備方法，其特征在于，所述的含健康桃小食心蟲蟲尸浸出液的PDA斜面培養基配比為：馬鈴薯200g/L，葡萄糖20g/L，瓊脂20g/L，桃小食心蟲幼蟲干蟲尸10g/L。

4.如權利要求2所述的一種防治桃小食心蟲的白僵菌制劑的制備方法，其特征在于，所述的固體培養基中原料按重量百分比計：麥麩70，谷殼28，奶粉2。

5.如權利要求2所述制備方法制得的白僵菌制劑的施用方法：在發生桃小食心蟲的樹根基部外圍1米左右的1-2cm厚的表層土撥開，將白僵菌菌粉制劑與土壤按1︰0.5-1.5比例拌勻后均勻撒施，然后再將表層土蓋好即可；用量為150-250g/株，施用時間為桃小食心蟲將要脫果入土越冬前。