[發(fā)明專利]一種蛹蟲草蛋白質(zhì)提取工藝及其最佳提取條件的優(yōu)化方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210181122.6
• 申請(qǐng)日: 2012-06-05
• 公開（公告）號(hào): CN102690321A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳小明;李晨曦;范青生;余宙;姜興華;劉劍青
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 惠州市鑫福來(lái)實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司;南昌大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K1/14
• 分類號(hào): C07K1/14
• 代理公司: 南昌市平凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 36122
• 代理人: 夏材祥

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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種蛹蟲草蛋白質(zhì)提取工藝及其最佳提取條件的優(yōu)化方法，屬保健食品制備領(lǐng)域。

背景技術(shù)

蛹蟲草[Cordyceps?militaris]，又名北冬蟲夏草，蛹草，蛹草菌等，為衛(wèi)生部公布的新資源食品，分類學(xué)上屬于真菌門(Eumycota)，子囊菌亞門(Ascomycotinia)，核菌綱(Pyrenomycetes)，球殼目(Sphaeriales)，麥角菌科(Claviciptiaceae)，蟲草屬(Cordycps)。冬蟲夏草與人參、鹿茸齊名為中國(guó)傳統(tǒng)的三大補(bǔ)品而馳名中外，藥化、藥理和臨床實(shí)驗(yàn)證明蛹蟲草完全可以作為冬蟲夏草的代用品。中醫(yī)認(rèn)為，蟲草入肺腎二經(jīng)，既能補(bǔ)肺陰，又能補(bǔ)腎陽(yáng)，主治腎虛，陽(yáng)痿遺精，腰膝酸痛，病后虛弱，久咳虛弱，勞咳痰血，自汗盜汗等，是唯一一種能同時(shí)平衡、調(diào)節(jié)陰陽(yáng)的中藥。研究表明蛹蟲草含有豐富的蛋白質(zhì)，有的甚至高達(dá)40.7%，人體必需氨基酸的種類齊全、比例適當(dāng)，占氨基酸總量的35.47%；同時(shí)含有V_A，V_B2，V_E，V_C，V_B1，V_D，V_B6和菸酸，以及含有蟲草素、蟲草多糖、腺苷、甘露醇、麥角甾醇等藥理成分。臨床研究表明，蛹蟲草具有免疫調(diào)節(jié)、抗疲勞、抗腫瘤、抗衰老、耐缺氧、降血壓、降血脂、鎮(zhèn)靜催眠、保護(hù)心腦組織等藥理作用。

蛹蟲草中含有大量的蟲草素，蟲草素是一種具有抗菌活性的核苷類物質(zhì)，對(duì)核多聚腺苷酸聚合酶有很強(qiáng)的抑制作用。在DNA轉(zhuǎn)錄mRNA過程中使mRNA成熟障礙，抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，并有降血糖的作用。近年來(lái)，蟲草素的特殊醫(yī)療保健功能已經(jīng)引起國(guó)內(nèi)外專家的高度重視。目前我國(guó)開發(fā)出蛹靈口服液、北蟲草膠囊、蟲草酒、蟲草羅漢精、蟲草補(bǔ)腎酒等一系列藥品和保健品。而這些針對(duì)于蟲草素、蟲草多糖、腺苷等功效成分開發(fā)的保健產(chǎn)品，生產(chǎn)時(shí)用水或食用酒精提取蟲草素、蟲草多糖、腺苷后，其余部分放棄利用，對(duì)于蛹蟲草中的蛋白質(zhì)研究和利用甚少，利用其而研發(fā)的相關(guān)保健品在市場(chǎng)上更是少見。而蛹蟲草中含有豐富的蛋白質(zhì)，有很大的開發(fā)價(jià)值。

通過單因素和響應(yīng)曲面實(shí)驗(yàn)優(yōu)化堿法提取蛹蟲草蛋白工藝，從而得到最佳的提取條件，為蛹蟲草蛋白的大規(guī)模生產(chǎn)及其產(chǎn)品的深加工提供理論依據(jù)，為其相關(guān)保健食品的開發(fā)提供參考資料。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一種堿法提取蛹蟲草蛋白質(zhì)的工藝，以及通過單因素和響應(yīng)曲面分析實(shí)驗(yàn)得到提取的最佳工藝。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：將蛹蟲草子實(shí)體粉碎過篩后經(jīng)過堿法浸提、酸沉、真空冷凍干燥等工藝過程制得蛹蟲草蛋白。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究得到蛹蟲草最佳提取工藝，依靠響應(yīng)曲面分析優(yōu)化提取工藝，擬合了浸提時(shí)間、提取溫度和堿液濃度三個(gè)因素對(duì)蛹蟲草蛋白得率的回歸模型，通過驗(yàn)證該模型能夠較好預(yù)測(cè)蛹蟲草蛋白得率，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證蛋白得率為8.892%，即蛋白質(zhì)提取率為31.2%。

本發(fā)明包括蛹蟲草蛋白質(zhì)提取工藝及其最佳提取條件的優(yōu)化方法兩個(gè)方面。

一、蛹蟲草蛋白質(zhì)提取工藝

（1）堿提：將蛹蟲草子實(shí)體進(jìn)行粉碎，80目過篩，然后將其和0.05-0.2mol/L濃度的氫氧化鈉溶液按1:8-30的料液比混合，在40~80℃溫度下浸提30~180min，浸提結(jié)束后，在3500r/min下離心30min，過濾；

（2）酸沉：將步驟1的濾液，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)濾液的pH至蛹蟲草蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.8，酸沉結(jié)束后在3000r/min下離心20min，過濾得沉淀，用蒸餾水洗沉淀；

（3）將沉淀真空冷凍干燥得到蛹蟲草蛋白。

二、蛹蟲草蛋白質(zhì)最佳提取條件的優(yōu)化方法

（1）通過單因素實(shí)驗(yàn)篩選出選取堿液濃度、提取溫度、浸提時(shí)間三個(gè)條件，進(jìn)行Box-Behnken實(shí)驗(yàn)，分別以A、B和C代表，每個(gè)自變量的低、中、高試驗(yàn)水平編碼分別為-1、0、1（見表1）；??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????

（2）按照Box-Behnken設(shè)計(jì)原理進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；

（3）利用Design?Expert?軟件分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到蛹蟲草蛋白得率的二次多項(xiàng)模型，篩選出蛹蟲草蛋白質(zhì)的最佳提取條件。