[發明專利]蟾蜍蛆蟲蛋白質在治療直腸癌藥品中的應用

有效

• 申請號: 201210179119.0
• 申請日: 2012-06-02
• 公開（公告）號: CN102657847A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 徐華民;趙榮華;趙艷琨;徐萌
• 申請（專利權）人: 哈爾濱工業大學
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61K9/127;A61K9/02;A61K47/28;A61K47/44;C07K14/435;A61P35/00
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1.一種蟾蜍蛆蟲蛋白質在治療直腸癌藥品中的應用。

2.根據權利要求1所述的蟾蜍蛆蟲蛋白質在治療直腸癌藥品中的應用，其特征在于所述治療直腸癌藥品是由蟾蜍蛆蟲蛋白質10～15g、卵磷脂0.1～1.5g、液體石蠟20～50g、烏桕脂100～200g制成的栓劑。

3.根據權利要求1或2所述的蟾蜍蛆蟲蛋白質在治療直腸癌藥品中的應用，其特征在于所述蟾蜍蛆蟲蛋白質按照下述方法獲得：

（1）將1000g干燥蟾蜍蛆蟲放入常溫膨化裝置，充入1～10kg氮氣、0.1～0.5kg氨氣，加壓至0.2～1.0Mpa，時間10～30min，然后瞬間釋放裝置內氣體，蟾蜍蛆蟲被膨化粉碎；

（2）膨化粉碎物料加入到膨脹溶劑體系提取裝置中，充入200～2000g二氧化碳、100～500g乙醇和100～200g二甲基甲酰胺，加壓至1～8Mpa，溫度10～25℃，時間10～60min，然后釋放壓力至常壓，收集混合液；

（3）混合液用分離機以1500～5000r/min分離，收集液相；

（4）收集液相用膜孔徑0.5～50μm微濾機過濾，得過濾液；

（5）將過濾液注入到saphacryls-100HR的凝膠過濾柱中在pH=3～12條件下過濾；

（6）濾液溶解于溶劑體系中，泵入超聲駐波液相制備色譜中，超聲駐波功率0.2～5.0KW、頻率500～1000kHz、流速50～500mL/min、紫外檢測器波長280nm，分離純化出蟾蜍蛆蟲蛋白質；

（7）純化蟾蜍蛆蟲蛋白質用真空冷凍干燥機在真空度200～800Kpa、溫度-50～30℃、時間6～24h的條件下，干燥至含水分5～8%的凍干蛋白質成品。

4.根據權利要求3所述的蟾蜍蛆蟲蛋白質在治療直腸癌藥品中的應用，其特征在于所述溶劑體系由氯仿-乙醇-甲醇-水按照4:3:3:2的體積比組成。

5.根據權利要求1所述的蟾蜍蛆蟲蛋白質在治療直腸癌藥品中的應用，其特征在于所述治療直腸癌藥品是由100g卵磷脂、30～80g膽固醇、10～50g蟾蜍蛆蟲蛋白質制成的脂質體。

6.根據權利要求1或5所述的蟾蜍蛆蟲蛋白質在治療直腸癌藥品中的應用，其特征在于所述蟾蜍蛆蟲蛋白質按照下述方法獲得：

（1）將1000g鮮蟾蜍蛆蟲用打漿機在500～1000r/min打漿10～30min，成為漿狀物；

（2）漿狀物中加入質量濃度為0.01～0.5%碳酸鈉水溶液5～20L，攪拌均勻，在常溫下放置30～120min；

（3）用離心機在1500～5000r/min條件下離心10～30min，收集液相；

（4）用膜孔徑0.2～5.0μm微濾機過濾上述液相，收集過濾液；

（5）將濾液注入到saphacryls-100HR凝膠過濾柱中在pH=3～12過濾得過濾液；

（6）過濾液溶解于溶劑體系中，泵入超聲駐波液相制備色譜中，超聲駐波功率0.2～5.0KW，頻率500～1000kHz，流量50～500mL/min，紫外檢測器波長280nm，連續純化分離蟾蜍蛆蟲蛋白質；

（7）純化蟾蜍蛆蟲蛋白質用真空冷凍干燥機在真空度50～500Kpa，溫度-30～30℃，時間6～24h條件下干燥至含水分5～8%成品。

7.根據權利要求6所述的蟾蜍蛆蟲蛋白質在治療直腸癌藥品中的應用，其特征在于所述溶劑體系由氯仿-乙醇-甲醇-水按照4:：3：3：2的體積比組成。