[發明專利]基于凝膠的核酸等溫擴增試劑的保存方法

有效

• 申請號: 201210178918.6
• 申請日: 2012-06-01
• 公開（公告）號: CN102703427A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 張慶利;黃倢;史成銀;梁艷;王勤濤;李美霞
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 張中南;曾慶國

1.一種基于凝膠的核酸等溫擴增試劑的保存方法，其特征在于所述的保存方法是將一種或幾種核酸等溫擴增反應液的組分包埋在凝膠內進行保存。

2.如權利要求1所述的保存方法，其特征在于所述的凝膠，其熔點低于用于核酸等溫擴增的聚合酶的滅活溫度。

3.如權利要求2所述的保存方法，其特征在于所述的凝膠，還包括有熔點高于核酸等溫擴增的聚合酶的滅活溫度的凝膠，且熔點高于核酸等溫擴增的聚合酶的滅活溫度的凝膠的添加質量不高于熔點低于核酸等溫擴增的聚合酶的滅活溫度的凝膠的10%。

4.如權利要求1所述的保存方法，其特征在于所述的核酸等溫擴增反應液的組分為用于核酸等溫擴增的聚合酶。

5.如權利要求4所述的保存方法，其特征在于所述的核酸等溫擴增反應液的組分還包括有引物、三磷酸脫氧核苷酸dNTP和/或三磷酸核苷酸NTP、核酸等溫擴增的聚合酶的反應緩沖液的任一種或幾種。

6.如權利要求4或5所述的保存方法，其特征在于所述的核酸等溫擴增的聚合酶為DNA聚合酶和/或RNA逆轉錄酶。

7.如權利要求4或5所述的保存方法，其特征在于所述的核酸等溫擴增的聚合酶為DNA聚合酶和/或RNA聚合酶。

8.如權利要求5所述的保存方法，其特征在于所述的核酸等溫擴增的聚合酶的反應緩沖液為依賴核酸序列的擴增的反應緩沖液、鏈替代擴增反應緩沖液或環介導等溫擴增反應緩沖液。

9.如權利要求1所述的保存方法，其特征在于操作步驟如下：首先將可形成凝膠的物質添加到核酸等溫擴增反應液的組分中，然后在低于核酸等溫擴增聚合酶的滅活溫度下將凝膠熔解，最后冷卻凝固進行保存。

10.如權利要求1所述的保存方法，其特征在于操作步驟如下：首先將可形成凝膠的物質與水混合加熱使之溶解配成濃縮的母液，然后將濃縮的母液加入到核酸等溫擴增反應液的組分中，最后讓溫度下降使混合物由液態凝固為固態或半固態的凝膠進行保存。

11.如權利要求9或10所述的保存方法，其特征在于所述的可形成凝膠的物質在核酸等溫擴增反應液的組分中的添加濃度質量體積百分比g/ml為0.01%~30%。

12.如權利要求9或10所述的保存方法，其特征在于所述的可形成凝膠的物質為能形成凝膠的多糖類物質和/或明膠類物質。

13.如權利要求12所述的保存方法，其特征在于所述的多糖類物質和/或明膠類物質為淀粉、糊精、凝結多糖、結冷膠、黃原膠、槐豆膠、亞麻籽膠、魔芋膠、殼聚糖、瓊脂、瓊脂糖、低熔點瓊脂糖、超低熔點瓊脂糖、紅藻膠、海藻酸、海藻酸鹽、卡拉膠、果膠、低甲氧基果膠、明膠、阿拉伯膠中的任一種或幾種。

14.如權利要求9或10所述的保存方法，其特征在于所述的可形成凝膠的物質為能形成凝膠的人工聚合物。

15.如權利要求14所述的能形成凝膠的人工聚合物為甲基纖維素、羧甲基纖維素、丙烯酰胺、聚丙烯酰胺中的任一種或幾種。

16.如權利要求13所述的保存方法，其特征在于所述的凝結多糖在核酸等溫擴增反應液的組分中的添加濃度質量體積百分比g/ml為0.2%~3%。

17.如權利要求13所述的保存方法，其特征在于所述的超低熔點瓊脂糖在核酸等溫擴增反應液的組分中的添加濃度質量體積百分比g/ml為0.3%~3.5%。