[發明專利]檢測PJVK基因c.886C>T突變的試劑盒

無效

• 申請號: 201210172361.5
• 申請日: 2012-05-29
• 公開（公告）號: CN102864216A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 王秋菊
• 申請（專利權）人: 王秋菊;中國人民解放軍總醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 黃韌敏

1.一種用于檢測與感音神經性聾及聽神經病/聽神經病譜系障礙相關的位于PJVK基因的c.886C>T突變的試劑盒，所述試劑盒包括：

從待測樣品中提取DNA的試劑；

用于擴增樣本DNA的PCR反應試劑；

對PCR擴增產物進行測序的試劑；

其中，所述擴增樣本DNA的PCR反應試劑包括PCR引物，所述PCR引物擴增的目標片段包含PJVK基因第886位堿基。

2.如權利要求1所述試劑盒，其中所述PCR引物為選自下述引物中的一對：

PJVK-7F-1:5’-GCCAGACCCTGTCTCAAAAA-3’，

PJVK-7R-1:5’-GGGAATATGATACCCAGACAGG-3’；

PJVK-7F-2:5’-GTGCACCTGTAGTCCCAGC-3’，

PJVK-7R-2:5’-GGCATGATTCATAATCTCTG-3’；

PJVK-7F-3:5’-CAAATTATTTCATGACTAGTGG-3’，

PJVK-7R-3:5’-CAAAAATGATTCTAAAGTGACT-3’；

PJVK-7F-4:5’-CCAGCTTGGGTGACAGAG-3’，

PJVK-7R-4:5’-GATTCTAAAGTGACTGGCATGA-3’。

3.如權利要求1或2所述試劑盒，所述試劑盒用于檢測位于PJVK基因的c.886C>T突變的方法，包括以下步驟：

1）采集待測個體的血液、體液或組織樣本，提取DNA；

2）以該DNA為模板，以PCR引物進行PCR反應，得到PCR反應產物；

其中，所述PCR引物擴增的目標片段包含PJVK基因886位堿基；

3）將得到的PCR反應產物進行直接測序，并將測序結果與PJVK正常基因的序列進行比較，確定是否存在PJVK基因的c.886C>T突變位點。

4.如權利要求3所述試劑盒，其中所述方法還進一步包括下述步驟：

4）按照正常閱讀框架進行翻譯以確定c.886C>T突變使氨基酸序列自296位發生無義突變，使氨基酸編碼在296位終止（p.R296X）。

5.如權利要求1所述的試劑盒在用于檢測感音神經性聾及聽神經病/聽神經病譜系障礙中的用途。