[發明專利]檢測CDH23基因c.403C>T突變的試劑盒

無效

• 申請號: 201210171754.4
• 申請日: 2012-05-29
• 公開（公告）號: CN102732616A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 王秋菊
• 申請（專利權）人: 王秋菊;中國人民解放軍總醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 黃韌敏

1.一種用于檢測與遺傳性耳聾和/或Usher?1D綜合征相關的位于CDH23基因的c.403C>T突變的試劑盒，所述試劑盒包括：

從待測樣品中提取DNA的試劑；

用于擴增樣本DNA的PCR反應試劑；

對PCR擴增產物進行測序的試劑；

其中，所述擴增樣本DNA的PCR反應試劑包括PCR引物，所述PCR引物擴增的目標片段包含CDH23基因403位堿基。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其中所述的PCR引物為選自下述引物中的一對：

CDH23-6F-1:5′-TGGGGTCACAGGATTTCT-3′，

CDH23-6R-1:5′-GCTCTCCCCACCTGACTCT-3′；

CDH23-6F-2:5′-AGGGTGGAAGAGGCCAGAGT-3′，

CDH23-6R-2:5′-TTCGCCAACCTGCTCAGAGT-3′；

CDH23-6F-3:5′-CCGCCTTTCTCTTGCCAGGT-3′，

CDH23-6R-3:5′-GAAAGCCCCTTCCTAGAACTGCAT-3′；

CDH23-6F-4:5′-CCCCCCTCCCTCTCTCACT-3′，

CDH23-6R-4:5′-AGCAGCAGGTCTCTGATACCC-3′；

CDH23-6F-5:5′-TTCACCGTGGAGTTCTCTGT-3′，

CDH23-6R-5:5′-AACCCCAGTGGCTCCTACCT-3′。

3.如權利要求1或2所述試劑盒，所述試劑盒用于檢測位于CDH23基因的c.403C>T雜合突變的方法，包括以下步驟：

1）采集待測個體的血液、體液或組織樣本，提取DNA；

2）以該DNA為模板，以PCR引物進行PCR反應，得到PCR反應產物；

其中，所述PCR引物擴增的目標片段包含CDH23基因第403位堿基；

3）將得到的PCR反應產物進行直接測序，并將測序結果與CDH23正常基因的序列進行比較，確定是否存在CDH23基因的c.403C>T雜合突變位點。

4.如權利要求3所述試劑盒，所述方法還進一步包括下述步驟：

4）按照正常閱讀框架進行翻譯以確定c.403C>T雜合突變使第135位的谷氨酰胺發生無義突變，并使氨基酸的編碼提前終止于第135位的氨基酸(p.Q135X)。

5.如權利要求1所述的試劑盒在用于檢測遺傳性耳聾和/或Usher?1D綜合征中的用途。