[發明專利]一種動物組織樣的基因組DNA提取試劑盒無效
| 申請號： | 201210169838.4 | 申請日： | 2012-05-29 |
| 公開（公告）號： | CN102676505A | 公開（公告）日： | 2012-09-19 |
| 發明（設計）人： | 付言峰;任守文;方曉敏;李碧俠;王學敏;李蘭 | 申請（專利權）人： | 江蘇省農業科學院 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人： | 張素卿 |
| 地址： | 210014 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 動物 組織 基因組 dna 提取 試劑盒 | ||
1.一種動物組織樣的基因組DNA提取試劑盒，包括：
溶液A：細胞裂解液；溶液B?：6?mol/L的NaCl溶液；溶液C：三氯甲烷；溶液D?：TE緩沖液和蛋白酶K。
2.權利要求1所述一種動物組織樣的基因組DNA提取試劑盒的用法，其特征在于：
1）碎化組織樣：將動物組織樣用剪刀切下20-60?mg，放在一個1.5?ml離心管蓋里，加100?μl溶液A，再把組織樣剪碎，然后再加入300?μl的溶液A；
2）消化蛋白質：向離心管內加入15?μl的蛋白酶K，上下顛倒搖勻，放于65?°C的振動水浴鍋內，水浴2個小時；
3）分離DNA：將水浴后的樣品加入200?μl溶液B，然后放在冰塊上，再加入500?μl溶液C，上下搖動10分鐘，將樣品4?oC?離心12000轉/分，10分鐘；
4）析出DNA：取離心管內的上清液600?μl到新的1.5ML離心管中，加入1000?μl無水乙醇或等體積的異丙醇，搖動離心管直至DNA析出，靜置2分鐘；將析出DNA的離心管4?oC離心,?12000?轉/分，5分鐘；
5）洗滌DNA：倒出離心管中溶液后，離心管中再加入1000?μl的70%（體積比）乙醇，充分洗滌；4?oC離心,?12000轉/分，2分鐘；重復此步驟，洗滌第二次；
6）快速干燥DNA：倒出離心管中溶液，用衛生紙吸走管口殘液，離心甩下管壁上的乙醇，用10?ul移液器吸走剩余乙醇，倒置5分鐘離心管；
7）溶解DNA：加入130-600?ul的溶液D或ddH2O，放置4?oC保存過夜，待用。
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