[發明專利]一種利用線粒體分子標記快速鑒定縊蟶群體的方法無效
| 申請號： | 201210168243.7 | 申請日： | 2012-05-25 |
| 公開（公告）號： | CN102776278A | 公開（公告）日： | 2012-11-14 |
| 發明（設計）人： | 牛東紅;李家樂;沈和定;王劦;金凱 | 申請（專利權）人： | 上海海洋大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海天翔知識產權代理有限公司 31224 | 代理人： | 呂伴 |
| 地址： | 201306 上海市*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 線粒體 分子 標記 快速 鑒定 群體 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種利用線粒體分子標記快速鑒定縊蟶群體的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：
（1）采集縊蟶個體，提取DNA；
（2）合成線粒體細胞色素氧化酶I標記引物；
（3）對縊蟶群體的線粒體細胞色素氧化酶I(COI)基因進行PCR擴增；
（4）對PCR產物進行純化；
（5）對純化的PCR產物進行測序和序列比對。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中，所述標記引物為：
Sc-COI-F：5’GGT?CAA?CAA?ATC?ATA?AAG?ATA?TTG?G?3’；
Sc-COI-R：5’TAA?ACT?TCA?GGG?TGA?CCA?AAA?AATCA?3。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述PCR擴增程序為：
（a）94℃預變性3min，進行35個循環：
（b）94℃變性30s，50℃退火30s，72℃延伸50s；
（c）最后72℃延伸10min。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述PCR擴增所用反應體系為25μL，含10×Buffer?2.5μL，Mg2+2.0mmol/dm3，dNTP0.2mmol/dm3，TaqDNA聚合酶1U，上、下游引物各0.2μmol/dm3，模板DNA50-100ng。
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