[發明專利]一種清毒安腎膠囊指紋圖譜的建立方法及其應用

有效

• 申請號: 201210167274.0
• 申請日: 2012-05-25
• 公開（公告）號: CN103424498A
• 公開（公告）日: 2013-12-04
• 發明（設計）人: 宋艷剛;劉學華;黃文華;劉東來;胡淑毅;孫虹;曹暉;沈琳;江曉漫
• 申請（專利權）人: 麗珠集團利民制藥廠;國家中藥現代化工程技術研究中心
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 北京瑞恒信達知識產權代理事務所(普通合伙) 11382
• 代理人: 曹津燕;李渤

1.一種清毒安腎膠囊指紋圖譜的建立方法，該建立方法包括以下步驟：

（1）將清毒安腎膠囊的內容物溶于70%體積比的乙醇水溶液，制成濃度為5mg/ml的供試品溶液；

（2）采用高效液相色譜-質譜聯用儀檢測供試品溶液，獲得總離子流圖譜；其中，所述高效液相色譜檢測采用C₁₈反相鍵合硅膠色譜柱，流動相1和流動相2進行梯度洗脫，并以電噴霧檢測器檢測，所述流動相1為0.1%（體積比）的甲酸水溶液，流動相2為0.1%（體積比）的甲酸乙腈溶液，按體積百分比計，所述洗脫梯度如下：

0-0.5分鐘，流動相1為95%，流動相2為5%；

0.5-3分鐘，流動相1由95%勻速變為80%，流動相2由5%勻速變為20%；

3-13分鐘，流動相1由80%勻速變為60%，流動相2由20%勻速變為40%；

13-18分鐘，流動相1由60%勻速變為0，流動相2由40%勻速變為100%；

18-20分鐘，流動相1為0，流動相2為100%。

2.一種清毒安腎膠囊有效成分的檢測方法，該檢測方法包括以下步驟：

（1）將清毒安腎膠囊的內容物溶于70%（體積比）的乙醇水溶液，制成濃度為5mg/ml的供試品溶液；

（2）將芍藥苷、淫羊藿苷、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、阿魏酸、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、黃芪甲苷、大黃酸和大黃素溶于甲醇制備對照品溶液，各組分濃度均為0.02mg/ml；

（3）采用高效液相色譜-質譜聯用儀分別檢測供試品溶液和對照品溶液，獲得總離子流圖譜；其中，所述高效液相色譜檢測采用C₁₈反相鍵合硅膠色譜柱，流動相1和流動相2進行梯度洗脫，并以電噴霧檢測器檢測，所述流動相1為0.1%（體積比）的甲酸水溶液，流動相2為0.1%（體積比）的甲酸乙腈溶液，按體積百分比計，所述洗脫梯度如下：

0-0.5分鐘，流動相1為95%，流動相2為5%；

0.5-3分鐘，流動相1由95%勻速變為80%，流動相2由5%勻速變為20%；

3-13分鐘，流動相1由80%勻速變為60%，流動相2由20%勻速變為40%；

13-18分鐘，流動相1由60%勻速變為0，流動相2由40%勻速變為100%；

18-20分鐘，流動相1為0，流動相2為100%。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述供試品溶液的總離子流圖譜包括具有如下保留時間及離子質量數的特征峰：4.4min（525.1614）、4.8min（491.1195）、5.2min（193.0506）、6.4min（977.5327）、6.9min（845.4904）、8.9min（721.2349）、10.9min（599.2997）、12.1min（829.4591）、12.8min（945.5428）、14.0min（283.0248）、16.2min（269.0455）。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其中，所述供試品溶液的總離子流圖譜包括具有如下保留時間及離子質量數的特征峰：4.4min（525.1614）、4.8min（491.1195）、5.2min（193.0506）、6.4min（977.5327）、6.9min（845.4904）、7.8min（507.1508）、8.1min（463.1610）、8.3min（645.2193）、8.5min（867.2939）、8.9min（721.2349）、10.1min（623.1770）、10.9min（599.2997）、12.1min（829.4591）、12.8min（945.5428）、13.7min（871.4697）、14.0min（283.0248）、14.2min（659.2345）、15.0min（513.1766）、15.4min（913.4802）、16.2min（269.0455）、16.9min（535.3640）。

5.根據權利要求3或4所述的方法，其中，所述方法還包括步驟（4）：

以供試品溶液的總離子流圖中的保留時間為4.4min的特征峰為S峰，計算各特征峰的相對保留時間；計算供試品溶液的總離子流圖和對照品溶液的總離子流圖中保留時間相對應的特征峰之間的峰面積比值。