[發明專利]來自辣椒疫霉菌的阿魏酸酯酶PCFAE2及其編碼基因與應用

有效

• 申請號: 201210164062.7
• 申請日: 2012-05-24
• 公開（公告）號: CN102676468A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 張修國
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/44;A01N61/00;A01P3/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及一種阿魏酸酯酶及其編碼基因與應用，特別涉及來自辣椒疫霉菌的阿魏酸酯酶PCFAE2及其編碼基因與應用。

背景技術

辣椒疫霉菌（Phytophthora?capsici?Leonian）屬真菌門、鞭毛菌亞門、卵菌綱、霜霉目。辣椒疫霉菌是一種寄主范圍廣的致病菌，除侵染辣椒外，還侵染其它作物。周啟明等報道侵染9科21種栽培植物和雜草；任光馳等試驗結果認為該菌可危害茄子、黃瓜、番茄、豇豆、菜豆、白菜、甘藍、蘿卜、胡蘿卜、桃、杏、蘋果等。對蔥、蒜侵染力弱，對柑桔及馬鈴薯莖、葉不侵染。對辣椒的致病力最強。

辣椒疫病是由辣椒疫霉菌（Phytophthora?capsici?Leonian）所引起的一種土傳病害，可經雨水、土壤、氣流等多種途徑傳播，除了引起大面積死秧外，還可造成葉片枯萎、果實腐爛、莖桿出現壞死斑，以及萎蔫死亡等多種癥狀。中國首次于20世紀40年代在江蘇報道此病的發生，此后陸續有相關報道,且表現為逐年加重的趨勢。80年代以來，辣椒疫病在全國各地普遍發生，新疆、北京、黑龍江、貴州、上海、青海、云南、陜西、甘肅、廣東以及長江流域尤為嚴重。辣椒疫病是辣椒栽培及生產上一種世界性分布較廣的毀滅性病害，該病發病周期短，流行速度快，給生產上帶來嚴重的經濟損失。深入開展辣椒疫霉菌致病基因的分離及鑒定對辣椒疫霉菌所導致的多種植物病害的防治與研究具有重要的實踐意義。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種阿魏酸酯酶。

本發明所提供的阿魏酸酯酶，名稱為PCFAE2，來源于辣椒疫霉菌（Phytophthora?capsici)SD33，是如下a）或b）或c）的蛋白質：

a）由序列表中序列2第21-569位所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

b）由序列表中序列2所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

c）將序列表中序列2所示的氨基酸序列或序列2第21-569位所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與辣椒疫霉菌致病性相關的由a）衍生的蛋白質。

其中，序列表中序列2由569個氨基酸殘基組成，第1-20位氨基酸組成信號肽。a）所述的蛋白質是阿魏酸酯酶的成熟蛋白，b）所述的蛋白質是阿魏酸酯酶的前體蛋白。

為了使上述（a）中的蛋白便于純化，可在由序列表中序列2所示的氨基酸序列組成的蛋白質的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標簽。

表1??標簽的序列

??標簽?殘基??序列??Poly-Arg?5-6（通常為5個）??RRRRR??Poly-His?2-10（通常為6個）??HHHHHH??FLAG?8??DYKDDDDK??Strep-tag?II?8??WSHPQFEK??c-myc?10??EQKLISEEDL