[發明專利]一種利用蝦殼制備抗氧化肽的方法

無效

• 申請號: 201210161452.9
• 申請日: 2012-05-23
• 公開（公告）號: CN102676623A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 羅自生;施旭丹;王延圣
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高

技術領域

本發明涉及一種利用蝦殼制備抗氧化肽的方法，屬于生物技術領域。

背景技術

隨著科學研究的發展，尤其是自由基理論的提出，人類對于機體的衰老有了更加深入的了解，認識到自由基過量不僅能夠導致機體老化，而且還會導致多種疾病。利用抗氧化物質來消除自由基，可以延緩衰老，增強免疫力，預防疾病的發生。因此，抗氧化物質近年來已成各國科研人員研究的熱點。

抗氧化肽是抗氧化物質中一大門類，通常把具有抑制生物大分子過氧化或清除體內自由及功能的生物活性肽成為抗氧化肽。抗氧化肽以非活性狀態存在于蛋白質長鏈中，采用適當的方法水解蛋白質可以得到這些寡肽，而且它們具有原蛋白質或組成氨基酸所沒有的功能，與機體的代謝調節、免疫、內分泌、衰老等有著十分密切的關系，在生命活動中起著非常重要的作用。近些年來，隨著人們對合成抗氧化劑安全問題的日益重視，天然抗氧化肽因為其較強的抗氧化性和高安全性，正受到越來越多的關注。國內外對天然抗氧化肽進行了大量研究，已有多種保健產品和藥物推向市場，市場前景十分可觀。抗氧化肽主要由蛋白質經蛋白酶水解產生，采用的蛋白質種類很多，其中主要是陸地蛋白質資源，包括等大米蛋白、玉米蛋白、乳清蛋白、酪蛋白等。此外，從海洋生物中提取蛋白制備抗氧化肽也越來越受到人們的關注，例如利用地鱉、扇貝、鯊魚皮等制備抗氧化肽。

對蝦養殖是我國水產養殖中一個很重要的領域。在對蝦加工過程中會產生大量的蝦頭和蝦殼下腳料，占整個蝦重量的30%～40%，其中大部分沒有被充分利用，這樣既造成浪費，又污染了環境，因而對于蝦類加工副產物的綜合利用顯得十分迫切。蝦殼中富含多種營養成分，幾丁質含量為10%～20%，?蛋白質含量為20%～40%?，F有的蝦殼綜合利用研究主要集中在分離提取甲殼素、殼聚糖、蝦青素等活性物質，而蝦殼中的蛋白質資源尚未得到充分利用。

?國內關于利用蛋白酶水解蝦殼制取抗氧化肽的研究未見報道。來自蝦殼的抗氧化肽，安全性高，無毒副作用。利用蝦殼開發具有清除自由基、延緩衰老作用的抗氧化肽具有重要的理論意義和應用價值。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種利用蝦殼制備抗氧化肽的方法，該制備方法工藝簡單、反應溫度低，以蝦類產品加工的副產物蝦殼為原料，成本低廉，在避免對環境污染的同時，加強了對蝦殼中蛋白質資源的綜合利用，制得的抗氧化肽安全性高，無毒副作用，清除自由基能力強，具有很好的保健功效。

一種利用蝦殼制備抗氧化肽的方法的步驟如下：

A）將蝦殼清洗除雜，在40～60℃下烘干20～26小時，用粉碎機磨粉，過40～100目篩，制成蝦殼粉，然后加水配制成質量百分比為4～8%的蝦殼粉溶液；?

B）將蝦殼粉溶液的pH調節到8.0～12.0，然后加入蛋白酶1000～5000U/g，在20～80℃水浴中水解1～4小時，水解在攪拌狀態下進行，并保持溫度和pH恒定，得到蝦殼蛋白水解液；

C）將蝦殼蛋白水解液于85～100℃水浴滅活蛋白酶10～20分鐘，冷卻至室溫后，在2000～6000r/min轉速下離心10～20分鐘，取上清液，用截留分子量≤10000Da的超濾膜進行超濾，得到蝦殼多肽超濾液；

D）將蝦殼多肽超濾液進行減壓蒸發濃縮和真空冷凍干燥，得到蝦殼抗氧化肽產品。

所述的蛋白酶為堿性蛋白酶。

另一種利用蝦殼制備抗氧化肽的方法的步驟如下：

A）將蝦殼清洗除雜，在50℃下烘干24小時，用粉碎機磨粉，過60目篩，制成蝦殼粉，然后加水配制成質量百分比為6.5%的蝦殼粉溶液；?

B）將蝦殼粉溶液的pH調節到10，然后加入堿性蛋白酶3500U/g，在50℃水浴中水解2.5小時，水解在攪拌狀態下進行，并保持溫度和pH恒定，得到蝦殼蛋白水解液；

C）將蝦殼蛋白水解液于95℃水浴滅活堿性蛋白酶15分鐘，冷卻至室溫后，在4000r/min轉速下離心15分鐘，取上清液，用截留分子量為5000Da的超濾膜進行超濾，得到蝦殼多肽超濾液；

D）將蝦殼多肽超濾液進行減壓蒸發濃縮和真空冷凍干燥，得到蝦殼抗氧化肽產品。

本發明制備的具有清除自由基功能的抗氧化肽分子量較低，極易被人體吸收和利用，活性比較穩定，能夠有效地延緩衰老，提高免疫力，在保健產品領域有著廣闊的市場前景。?