[發(fā)明專利]一種從珍珠菜中提純二苯乙烯苷的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210160576.5
• 申請日: 2012-05-22
• 公開（公告）號: CN102718812A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發(fā)明（設計）人: 曹蔚;王四旺;謝艷華;楊倩;孫紀元;繆珊
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學
• 主分類號: C07H15/203
• 分類號: C07H15/203;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明屬于中藥中有效成分提取與分離技術領域，具體涉及從珍珠菜中提取分離二苯乙烯苷的方法。

背景技術

2，3，5，4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(簡稱二苯乙烯苷)，為白色無定形粉末，易溶于水、甲醇、乙醇，具有重要的藥用價值：可明顯改善腦損傷動物模型的學習記憶障礙，對老年性癡呆等神經(jīng)退行性疾病有治療作用[張?zhí)m，邢穎，趙玲，等.不同時程APP轉基因小鼠學習記憶改變及參烏膠囊、二苯乙烯苷的干預作用.中國行為醫(yī)學科學，2006，15(3)：193-196]；可清除自由基，降低體內脂質的過氧化水平，產生延緩衰老的作用[Lv?LS，Gu?XH，Tang?J，et?al.Antioxidant?activity?of?stilbene?glycosides?from?poygonum?multiflorum.Food?Chemistry，2007，104(4)：1678-1681]；能夠降低高膽固醇血癥動物和高脂小鼠的血漿膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、極低密度脂蛋白膽固醇及甘油三酯水平，產生降血脂作用[Yang?PY，Almofti?MR，Lu?L，et?al.Reduction?of?atherosclerosis?in?cholesterol-fed?rabbits?and?decrease?of?expressions?of?intracellular?adhesion?molecule-1?and?vascular?endothelial?growth?factor?in?foam?cells?by?a?water-solution?fraction?of?polygonum?multiflorum.J?Pharmacol?Sci，2005，99(3)：294-300]；抑制血管內皮生長因子(VEGF)等動脈粥樣硬化危險因素的產生，起到抗動脈粥樣硬化的作用[張偉，王玉琴，李鋒，沈燕，王春華.二苯乙烯苷對ox-LDL誘導的U937細胞ICAM-1、VCAM-1及VEGF表達的影響.中國藥理學通報.2008；24(5)：667-672]；此外，還具有肝保護和抗腫瘤等[謝嵐.何首烏及二苯乙烯苷的研究進展.天津藥學，2010，22(3)：70-73]作用。

二苯乙烯苷結構復雜、穩(wěn)定性差，合成困難，目前均為從何首烏藥材中提取分離制備所得。但由于何首烏藥用資源有限，尋找新的價格低廉的提取原料對于二苯乙烯苷的綜合開發(fā)十分重要。發(fā)明人對多種中藥材中二苯乙烯苷的含量進行了測定，發(fā)現(xiàn)珍珠菜(Lysimachia?clethroide?Duby)中含有0.49～1.28％的二苯乙烯苷。

珍珠菜(Lysimachia?clethroide?Duby)為報春花科珍珠菜屬多年生草本植物。廣泛分布于我國東北、華北、華東、中南、西南及河北、陜西等地，資源十分豐富，以珍珠菜作為二苯乙烯苷的新來源，從中提取二苯乙烯苷，可產生更大的經(jīng)濟效益。

珍珠菜全草入藥，具有清熱解毒、活血調經(jīng)、利水消腫等功效。文獻報道已從該植物分離得到黃酮、三萜、揮發(fā)油、有機酸、甾醇、醌類、生物堿等多種化學成分[任風芝，鄭建坤，屈會化，等.珍珠菜脂溶性部位的化學成分研究.解放軍藥學學報，2001，17(4)：178-180；鄒海艷，屠鵬飛.珍珠菜黃酮類化合物的研究.中國天然藥物，2004，2(1)：59-61]。其中珍珠菜屬植物中都含有豐富的黃酮及黃酮苷，黃酮苷元主要為山柰酚、槲皮素、異鼠李素等。

我們通過進一步制備工藝的探索和研究，開發(fā)出工藝簡單、有效成分損失少、工藝路線穩(wěn)定、生產成本低的珍珠菜中制備二苯乙烯苷的工藝。

發(fā)明內容

本發(fā)明提供一種工藝穩(wěn)定、收率和純度高的珍珠菜中提取、分離、純化二苯乙烯苷的方法，該制備方法包括以下步驟：

取珍珠菜藥材，粉碎成粗粉，用40～80％乙醇提取，提取液減壓濃縮至每毫升含原藥材量0.5～2.0g的浸膏，用乙醚或石油醚萃取，有機溶劑萃取過的水溶液加3～6倍藥材重量的去離子水稀釋后，以3000轉/分的轉速離心10分鐘，上清液上大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫除雜，棄去，再用20～30％濃度乙醇洗脫雜質，然后再用40～60％的乙醇解吸，收集解吸液，減壓濃縮至小體積，冷凍干燥，得二苯乙烯苷粗品；將二苯乙烯苷粗品溶解于氯仿-甲醇(1∶1)中，上葡聚糖凝膠Sephadex?LH-20柱，用氯仿-甲醇(1∶1)洗脫，同時用高效液相色譜監(jiān)測至洗脫液中無二苯乙烯苷為止，收集洗脫液，減壓濃縮，冷凍干燥得二苯乙烯苷。