[發明專利]快速提取大量樣品微量DNA的方法及其在利用SSR標記鑒定作物雜交種純度上的應用無效
| 申請號： | 201210153442.0 | 申請日： | 2012-05-17 |
| 公開（公告）號： | CN102676504A | 公開（公告）日： | 2012-09-19 |
| 發明（設計）人： | 王玉剛;馮輝;李承彧;劉志勇;冀瑞琴;聶子靜;薛一花 | 申請（專利權）人： | 沈陽農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 沈陽科威專利代理有限責任公司 21101 | 代理人： | 張述學 |
| 地址： | 110866 遼*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 快速 提取 大量 樣品 微量 dna 方法 及其 利用 ssr 標記 鑒定 作物 雜交種 純度 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種快速提取大量樣品微量DNA的方法，其特征是包括如下步驟：
1）取深孔板1個，每孔加1-1.5克石英砂，再加入1個直徑3mm?的小鋼珠球，將幼葉或根尖放入深孔板的每個孔中，利用排槍向每孔中加入CTAB提取液100ul，蓋上板蓋，進行研磨，每秒25-30次，研磨2-3分鐘；
2）65℃水浴10?min，水浴后1500?r/min?離心1min，然后加入100ul的氯仿和異戊醇混合液，混合液的兩者體積比24：1，蓋上板蓋，輕輕混勻；
?3）4000?r/min離心10?min，取上清液30ul，轉移至新的普通PCR板中，加入20ul在-20℃下預冷的異丙醇，蓋上PCR板板蓋；
4）4000?r/min離心10?min，快速翻轉PCR板，傾倒試管中的全部液體，將試管板在多層干燥的吸水紙上不同的位置吸濕2-3?次，以吸去多余的液體；晾干后，加入30ul的TE溶液，-4℃保存備用即可。
2.一種如權利要求1所述快速提取大量樣品微量DNA的方法在作物SSR雜交種純度鑒定上的應用，其特征是：DNA所涉及作物為黃瓜、大白菜、西瓜。
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