[發(fā)明專利]一種構(gòu)建組織工程血管的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210150543.2
• 申請(qǐng)日: 2012-05-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102697581A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 付煒;薛繼鑫;何曉敏;殷猛;鄭景浩;王偉;徐志偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬上海兒童醫(yī)學(xué)中心
• 主分類號(hào): A61F2/06
• 分類號(hào): A61F2/06;A61L27/36
• 代理公司: 上海卓陽(yáng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31262
• 代理人: 巫蓓麗

1.一種血管脫細(xì)胞基質(zhì)膜片的制備方法，其特征在于，所述的方法是沿血管縱軸剪開(kāi)血管，剔除外膜及刮除內(nèi)皮層，切成長(zhǎng)方形血管塊，沿血管塊所在平面切成長(zhǎng)方形薄片，脫細(xì)胞后凍干。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的血管取自成年豬主動(dòng)脈弓及升主動(dòng)脈。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的長(zhǎng)方形血管塊長(zhǎng)15mm，寬10mm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的長(zhǎng)方形薄片的厚度是20μm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的脫細(xì)胞是采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%的SDS溶液脫細(xì)胞。

6.一種構(gòu)建組織工程血管的方法，其特征在于，它包括下列步驟：

a）按照權(quán)利要求1所述的方法制備血管脫細(xì)胞基質(zhì)膜片；

b）培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞；

c）三明治法構(gòu)建組織工程血管：胰蛋白酶消化步驟b）獲得的平滑肌細(xì)胞，將步驟a）的血管脫細(xì)胞基質(zhì)膜片和消化后的平滑肌細(xì)胞按照“膜片－細(xì)胞懸液－膜片－細(xì)胞懸液”的方式在硅膠管上層層疊加，置入含低糖DMEM和FBS的培養(yǎng)液中培養(yǎng)。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述的平滑肌細(xì)胞是人平滑肌細(xì)胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述的硅膠管外直徑為6mm，所述的細(xì)胞懸液每滴加5μl則所述的膜片環(huán)繞疊加20層。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述的組織工程血管是在含5%?CO_2?的37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，隔兩天半量換液，培養(yǎng)1周。