[發明專利]一種外周血單個核細胞的凍存液及凍存方法無效
| 申請號: | 201210149968.1 | 申請日: | 2012-05-15 |
| 公開(公告)號: | CN102669087A | 公開(公告)日: | 2012-09-19 |
| 發明(設計)人: | 劉韜 | 申請(專利權)人: | 深圳市博泰生物醫療機構管理有限公司 |
| 主分類號: | A01N1/02 | 分類號: | A01N1/02 |
| 代理公司: | 深圳中一專利商標事務所 44237 | 代理人: | 張全文 |
| 地址: | 518000 廣東省深圳市南山*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 外周血 單個 細胞 凍存液 方法 | ||
1.一種外周血單個核細胞凍存液,包含體積百分比為10-12%的滲透性冷凍保護劑,10-14%的β-葡聚糖,8-10%的血清或血漿,64-72%的生理鹽水。
2.根據權利要求1所述的外周血單個核細胞凍存液,其特征在于,所述滲透性冷凍保護劑選自甘油、二甲基亞砜、乙二醇和丙二醇中的一種或幾種。
3.根據權利要求1所述的外周血單個核細胞凍存液,其特征在于,所述生理鹽水為注射用生理鹽水。
4.根據權利要求1所述的外周血單個核細胞凍存液,其特征在于,所述血清為胎牛血清或小牛血清。
5.根據權利要求1所述的外周血單個核細胞凍存液,其特征在于,所述血漿為自體血漿。
6.一種外周血單個核細胞凍存方法,包括以下步驟:
(1)將外周血單個核細胞懸浮于細胞培養液中,獲得外周血單個核細胞懸液;
(2)將所述外周血單個核細胞懸液與權利要求1-5中任一項所述的外周血單個核細胞凍存液按照0.9-1.1∶1的比例混勻,分裝于細胞凍存管中;
(3)將所述細胞凍存管放置于程序凍存盒中,先于-80℃冷凍,然后轉入液氮中凍存。
7.根據權利要求6所述的外周血單個核細胞凍存方法,其特征在于,所述步驟(1)得到的外周血單個核細胞懸液中細胞密度為2-10×107個/ml。
8.根據權利要求6所述的外周血單個核細胞凍存方法,其特征在于,所述步驟(2)中分裝于細胞凍存管中的細胞數量為1-5×107個/支。
9.根據權利要求6所述的外周血單個核細胞凍存方法,其特征在于,所述步驟(3)中的程序凍存盒內裝有純異丙醇。
10.根據權利要求6所述的外周血單個核細胞凍存方法,其特征在于,所述步驟(3)中將程序凍存盒于-80℃冷凍時間為23-25小時。
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