[發(fā)明專(zhuān)利]一種基于微懸臂梁的檢測(cè)殺蟲(chóng)晶體蛋白Cry1Ab的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210146515.3
• 申請(qǐng)日: 2012-05-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102778569A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-11-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳驪珠;彭榮鵬;陳彬;佟振合
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院理化技術(shù)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/68
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京正理專(zhuān)利代理有限公司 11257
• 代理人: 張文祎

1.一種基于微懸臂梁的檢測(cè)殺蟲(chóng)晶體蛋白Cry1Ab的方法，其特征在于，該方法包含以下步驟：

將帶金膜的微懸臂梁進(jìn)行前處理，浸入巰基化試劑的醇類(lèi)溶液中，清洗；

將微懸臂梁浸入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的混合溶液中，清洗；

將微懸臂梁浸入殺蟲(chóng)晶體蛋白Cry1Ab抗體的生物緩沖溶液中，靜置；

將上述修飾有Cry1Ab抗體的微懸臂梁用于對(duì)殺蟲(chóng)晶體蛋白Cry1Ab的檢測(cè)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述巰基化試劑為11-巰基十一烷酸、6-巰基己酸或3-巰基丙酸，濃度為1×10^-4M~1×10^-3M。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述浸入巰基化試劑的醇類(lèi)溶液中的條件為：時(shí)間為12h~24h，溫度為15℃~37.5℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述前處理為：在濃H₂SO₄/30%H₂O₂的混合溶液中浸泡1min；所述濃H₂SO₄∶30%H₂O₂物質(zhì)的量的比值為7∶3。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述前處理還包括用去離子水清洗，氮?dú)獯蹈伞?/p>

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽的濃度為10mg/ml~100mg/ml；所述N-羥基琥珀酰亞胺的濃度為10mg/ml~100mg/ml；所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的體積比為1~5∶1；所述浸入的反應(yīng)時(shí)間為0.5h~4h。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述殺蟲(chóng)晶體蛋白Cry1Ab抗體的濃度為0.1mg/ml~1mg/ml。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述靜置的時(shí)間為4h~8h。