[發明專利]非人哺乳動物B淋巴細胞缺陷動物模型的制備方法及其用途

有效

• 申請號: 201210145037.4
• 申請日: 2012-05-10
• 公開（公告）號: CN103387955A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 王鑄鋼;王津津;張良梁;費儉;匡穎
• 申請（專利權）人: 上海南方模式生物科技發展有限公司;上海南方模式生物研究中心
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N15/09;A01K67/027;A61K49/00;A61K38/17;A61K45/00;A61P37/04
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 雷芳;趙向輝

1.一種非人哺乳動物的B淋巴細胞缺陷動物模型的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)提供非人哺乳動物的細胞，將所述細胞中的Gpr97基因失活，得到Gpr97基因失活的細胞；

(2)利用步驟(1)中得到的Gpr97基因失活的細胞，制備得到Gpr97基因失活的B淋巴細胞缺陷動物模型。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述將Gpr97基因失活包括基因剔除、基因中斷或基因插入。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述非人哺乳動物為嚙齒動物或靈長目動物，較佳地包括小鼠、大鼠、猴。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)利用DNA同源重組技術，將所述Gpr97基因中的外顯子1和2剔除，并用篩選標記替換，得到Gpr97基因突變的非人哺乳動物細胞；

(2)利用步驟(1)中得到的Gpr97基因突變的非人哺乳動物細胞制備得到嵌合非人哺乳動物；

(3)將步驟(2)中得到的嵌合非人哺乳動物和正常野生型非人哺乳動物交配繁育，在后代中篩選獲得Gpr97基因突變的雜合子非人哺乳動物；

(4)通過將步驟(3)中得到的雜合子非人哺乳動物相互交配獲得Gpr97基因突變的純合子非人哺乳動物，從而得到Gpr97基因失活的非人哺乳動物模型。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述篩選標記為neo基因。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中得到的Gpr97基因失活的非人哺乳動物模型中，與野生型對照小鼠相比，其免疫系統的B淋巴細胞在該模型的外周血、骨髓和/或脾臟組織中的百分含量下降。

7.根據權利要求1-6之任一項所述方法制備的非人哺乳動物模型的用途，其特征在于，將該模型用于研究人或動物中Gpr97基因的生物學功能。

8.根據權利要求1-6之任一項所述方法制備的非人哺乳動物模型的用途，其特征在于，將該模型用于篩選或鑒定能增加免疫系統中B淋巴細胞百分含量的物質。

9.根據權利要求8所述的用途，其特征在于，將該模型用于篩選或鑒定能增加該模型的外周血、骨髓和/或脾臟組織中B淋巴細胞百分含量的物質。

10.一種篩選或鑒定B淋巴細胞缺陷治療劑的方法，其特征在于，包括以下步驟：

a.將候選物質施用于權利要求1所述方法制備的非人哺乳動物模型；和

b.檢測所述動物模型的外周血、骨髓和/或脾臟組織中B淋巴細胞的百分含量；

其中，與對照相比，如果施用了候選物質的動物模型中所述B淋巴細胞的百分含量升高，則表明該候選物質是B淋巴細胞缺陷治療劑。

11.一種G蛋白偶聯受體97蛋白或其激動劑在制造用于增加免疫系統中B淋巴細胞百分含量的藥物中的用途。