[發(fā)明專利]醋糟基質(zhì)栽培中菌根真菌與拮抗菌聯(lián)用抗枯萎病的方法無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210144414.2 | 申請(qǐng)日： | 2012-05-11 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN102652487A | 公開(kāi)（公告）日： | 2012-09-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 肖翔;林英;司春燦;杜道林;戴志聰;曹丹鳴;王莉莉;王明娜 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 江蘇大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | A01G1/04 | 分類號(hào)： | A01G1/04 |
| 代理公司： | 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200 | 代理人： | 樓高潮 |
| 地址： | 212013 江*** | 國(guó)省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 基質(zhì) 栽培 菌根 真菌 拮抗 聯(lián)用 枯萎病 方法 | ||
1.菌根真菌及拮抗菌聯(lián)用提高醋糟基質(zhì)栽培抗黃瓜枯萎病的方法，其特征在于按照下述步驟進(jìn)行：
一、抗性菌劑芽孢桿菌的制備：
（1）?配置固體平板酵母膏蛋白胨培養(yǎng)基，于30℃?下培養(yǎng)對(duì)芽孢桿菌生防菌株進(jìn)行活化；
（2）將活化的菌體接種于含有2/5?酵母膏蛋白胨液體培養(yǎng)基的三角瓶中，30℃、200?rpm搖至對(duì)數(shù)期，取對(duì)數(shù)期菌液，7000?rpm離心?10min，取沉淀，加水將細(xì)菌重懸浮液調(diào)成l×108CFU/?ml；
其中所述的酵母膏蛋白胨液體培養(yǎng)基組成如下：酵母提取物5?g/l、蛋白胨10?g/l、NaCl?l0?g/l；
二、菌根真菌菌劑的制備：
（1）將菌根真菌Glomus?intraradices無(wú)菌體系，用10?mM檸檬酸鈉溶液以1:?10的體積混合溶解其中的植物凝膠，然后提取其中的菌根真菌孢子；
（2）將上步獲得的菌根真菌孢子，接種到按泥：沙體積比為1：3混合的滅菌土壤中，澆水后播種玉米作為共生作物，覆土100g，常規(guī)培養(yǎng)3個(gè)月后，獲得大量的菌根真菌菌劑；
三、菌根真菌及拮抗菌聯(lián)用雙接種連作的醋糟基質(zhì)：
（1）用質(zhì)量比為2：1：1的新鮮醋糟：蛭石：草炭混合配置的育苗基質(zhì)，進(jìn)行常規(guī)穴盤(pán)育苗；
（2）將上述步驟一和二中分別制取得到的抗性菌劑芽孢桿菌和菌根真菌，分別按不同的比例添加到連作3年的醋糟基質(zhì)中，其中菌根真菌菌劑按醋糟基質(zhì)的質(zhì)量比為3%添加，拮抗菌按保證醋糟中含有l(wèi)×105CFU/?g的菌體密度添加，將添加的菌根真菌和拮抗菌與醋糟基質(zhì)充分混勻；
（3）待穴盤(pán)出苗長(zhǎng)至4片真葉時(shí)，將小苗移栽至上述添加有菌根真菌和拮抗菌的醋糟基質(zhì)中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌根真菌及拮抗菌聯(lián)用提高醋糟基質(zhì)栽培抗黃瓜枯萎病的方法，其特征在于其中步驟一中的（1）酵母膏蛋白胨培養(yǎng)基組成為酵母提取物5?g/l、蛋白胨10?g/l、NaCl?l0?g/l，其余為水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌根真菌及拮抗菌聯(lián)用提高醋糟基質(zhì)栽培抗黃瓜枯萎病的方法，其特征在于其中步驟一中的（1）芽孢桿菌生防菌株為枯草芽孢桿菌B.?subtilis?JSB1。
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