[發(fā)明專利]一種用于檢測(cè)人視黃醇結(jié)合蛋白4的抗體復(fù)合物及免疫層析檢測(cè)卡和試劑盒

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210141597.2
• 申請(qǐng)日: 2012-05-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102650642A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-08-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邢國(guó)杰;沈鶴柏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海師范大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/558
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31227
• 代理人: 吳瑾瑜

1.一種用于檢測(cè)人視黃醇蛋白4的抗體復(fù)合物，其特征在于，制備方法為將人視黃醇蛋白4單克隆抗體1標(biāo)記于膠體金顆粒表面，包括以下步驟：

將含有膠體金顆粒的溶液pH調(diào)節(jié)至8.2～8.7，加入人視黃醇蛋白4單克隆抗體1，震蕩反應(yīng)5～15分鐘，封閉后離心、沉淀重懸后再次離心純化。

2.權(quán)利要求1所述用于檢測(cè)人視黃醇蛋白4的抗體復(fù)合物，其特征在于，所述膠體金顆粒的粒徑為10～30nm，含有膠體金顆粒的溶液濃度為0.5～2mg/mL。

3.權(quán)利要求1所述用于檢測(cè)人視黃醇蛋白4的抗體復(fù)合物，其特征在于，人視黃醇蛋白4單克隆抗體1與膠體金顆粒用量比為1～8μg：1mg。

4.權(quán)利要求1所述用于檢測(cè)人視黃醇蛋白4的抗體復(fù)合物，其特征在于，用pH=8.5～9.5、濃度為0.001～0.005mol/L的硼酸緩沖液重懸沉淀。

5.人視黃醇結(jié)合蛋白4的免疫層析檢測(cè)卡，其特征在于，結(jié)構(gòu)包括結(jié)合墊、樣品墊、分析膜和吸水紙，分析膜上包括檢測(cè)線和質(zhì)控線；

所述的結(jié)合墊上含有權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的用于檢測(cè)人視黃醇蛋白4的抗體復(fù)合物；

所述的檢測(cè)線上含有人視黃醇蛋白4單克隆抗體2。

6.權(quán)利要求5所述人視黃醇結(jié)合蛋白4的免疫層析檢測(cè)卡，其特征在于，所述質(zhì)控線上含有羊抗鼠IgG抗體。

7.權(quán)利要求5所述人視黃醇結(jié)合蛋白4的免疫層析檢測(cè)卡，其特征在于，所述結(jié)合墊的制備方法為：用于檢測(cè)人視黃醇蛋白4的抗體復(fù)合物與膠體金稀釋液混合按1:15～30的體積比混合后噴在結(jié)合墊材料上；

樣品墊的制備方法為：樣品墊材料用處理液浸泡并干燥。

8.權(quán)利要求7所述人視黃醇結(jié)合蛋白4的免疫層析檢測(cè)卡，其特征在于，樣品墊材料選自玻璃纖維素膜；結(jié)合墊材料選自玻璃纖維素膜；處理液為pH=7.2～7.5、0.005～0.02mol/L的磷酸緩沖液，含0.5%～1.0%BSA，0.3%～0.8%聚乙烯基吡咯烷酮，0.1%～0.3%吐溫-20；

膠體金稀釋液為0.03～0.08mol/L、pH=7.8～8.2的Tris-HCl緩沖液，含0.5%～1.0%BSA，0.3%～0.8%聚乙烯基吡咯烷酮，0.2%～0.5%聚乙烯醇，1.0%～3.0%蔗糖，0.1%～0.3%吐溫-20，聚乙烯醇的分子量為10000～25000。

9.一種檢測(cè)人視黃醇結(jié)合蛋白4的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求5～8任一項(xiàng)所述的人視黃醇結(jié)合蛋白4的免疫層析檢測(cè)卡和樣品稀釋液，所述樣品稀釋液為pH7.2～7.4、0.005～0.02mol/L的磷酸緩沖液，含有3%～6%BSA和0.3%～0.5%防腐劑。

10.權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的用于檢測(cè)人視黃醇蛋白4的抗體復(fù)合物在制備檢測(cè)人視黃醇蛋白4的試劑方面的應(yīng)用。