[發明專利]白頭翁湯顆粒可變波長指紋圖譜的建立方法及其標準指紋圖譜

有效

• 申請號: 201210141542.1
• 申請日: 2012-05-09
• 公開（公告）號: CN103389343A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 楊義芳;黃春躍;唐博雅;羅澤淵;李存勇;朱緒民;蒲琴
• 申請（專利權）人: 滇虹藥業集團股份有限公司;上海醫藥工業研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 謝燕軍;陳長會

技術領域

本發明涉及一種白頭翁湯的質量控制方法，具體涉及白頭翁湯顆粒可變波長指紋圖譜的建立方法及其標準指紋圖譜。

背景技術

白頭翁湯源自《傷寒論》，其組方為白頭翁、黃柏、黃連、秦皮四味藥，具清熱解毒、涼血止痢之功(謝鳴.方劑學.北京：人民衛生出版社，2002：134)。傳統用于熱毒深陷血分所致的熱痢下重，里急腹痛，大便膿血，渴欲飲水，肛門灼熱，舌紅苔黃，脈弦數等證。該方為治療濕熱痢疾的代表方。目前臨床主要用于治療消化系統疾病，包括細菌性痢疾、阿米巴痢疾等。

昆明滇紅藥業有限公司研發了我國第一個白頭翁湯顆粒制劑。已被列為云南省科技廳重大專項。

目前國內對白頭翁湯的質量控制局限于對主要成分的含量測定，還沒有文獻報道對白頭翁湯顆粒指紋圖譜的研究。而中藥指紋圖譜技術是一種表征中藥所含成分與其質量關系的有效手段，已成為國內外廣發認可的重要質量評價模式。

發明內容

本發明為白頭翁湯顆粒的質量控制和真偽鑒別提供一種新的方法，即建立白頭翁湯顆粒可變波長指紋圖譜的方法，并由此方法得到白頭翁湯顆粒的標準指紋圖譜。

本發明建立的可變波長指紋圖譜能夠較單波長指紋圖譜(即一般意義上的指紋圖譜)更全面的反應中藥的物質信息，增強了指紋峰的可視化比較；有效表征了白頭翁湯顆粒的質量，有利于產品質量監控。

因此本發明的第一個目的是提供一種白頭翁湯顆粒可變波長指紋圖譜的建立方法，所述方法包括以下步驟：

(1)制備對照品溶液：分別配制鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀、黃連堿、鹽酸藥根堿、秦皮甲素、秦皮乙素和白頭翁皂苷B4對照品溶液，優選濃度均為20～500μg/mL；

(2)制備供試品溶液：稱取白頭翁湯顆粒，優選0.1～10g，進行提取，提取液用微孔濾膜過濾，即得供試品溶液；

(3)采用高效液相色譜法進行測定得到指紋圖譜，其中色譜條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；采用梯度洗脫；紫外檢測波長：可變波長檢測；

(4)評價相似度：供試品指紋圖譜采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A版》進行評價。

本發明所使用的術語“可變波長程序檢測”是指利用二極管陣列檢測器(DAD)特有的程序可變波長功能，根據各組分的出峰順序，在不同時間段分別采用各組分的最佳吸收波長進行檢測的方法。

本發明所使用的術語“評價相似度”是指對現有的白頭翁湯顆粒供試品的指紋圖譜按照國家藥典委員會出版的《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A版》軟件進行相似度的評價。

以下具體描述以上各步驟。

(1)對照品溶液的制備：

A.鹽酸小檗堿對照品溶液的制備：精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，用甲醇配制成每1ml含鹽酸小檗堿0.1～0.5mg的溶液；

B.鹽酸巴馬汀對照品溶液的制備：精密稱取鹽酸巴馬汀對照品適量，用甲醇配制成每1ml含鹽酸巴馬汀0.1～0.5mg的溶液；

C.黃連堿對照品溶液的制備：精密稱取黃連堿對照品適量，用甲醇配制成每1ml含黃連堿0.1～0.5mg的溶液；

D.鹽酸藥根堿對照品溶液的制備：精密稱取鹽酸藥根堿對照品適量，用甲醇配制成每1ml含鹽酸藥根堿0.1～0.5mg的溶液；

E.秦皮甲素對照品溶液的制備：精密稱取秦皮甲素對照品適量，用甲醇配制成每1ml含秦皮甲素0.1～0.5mg的溶液；

F.秦皮乙素對照品溶液的制備：精密稱取秦皮乙素對照品適量，用甲醇配制成每1ml含秦皮乙素0.1～0.5mg的溶液；

G.白頭翁皂苷B4對照品溶液的制備：精密稱取白頭翁皂苷B4對照品適量，用甲醇配制成每1ml含白頭翁皂苷B40.1～0.5mg的溶液；

(2)供試品溶液的制備：精密稱取白頭翁湯顆粒0.1～10g，0％～50％(體積百分比)甲醇提取，再超聲提取，提取時間為10～80min，提取時間為優選為30min，提取液用微孔濾膜(孔徑為0.2μm～0.8μm，優選0.45μm)過濾，即得供試品溶液；