[發明專利]紅色熒光蛋白酵母細胞表達載體及構建方法

無效

• 申請號: 201210140915.3
• 申請日: 2012-05-07
• 公開（公告）號: CN102634538A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發明（設計）人: 李湘鳴;謝陽酶;李姍姍
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N15/66;C12N15/65
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.一種紅色熒蛋白酵母細胞表達載體，其特征在于該載體是將SEQ?ID?No.1所示序列經BamH?I和Sal?I雙酶切后與pUC57載體相連得pUC57/yDsRed；將酵母強啟動子GPD插入到pYestrp2載體中得到pGPD；然后再用BamH?I和Not?I對pUC57/yDsRed酶切，常規回收yDsRed目的片段，將目的片段插入到pGPD的相應酶切位點而獲得；該載體命名為pGPD/yDsRed。

2.如權利要求1所說的酵母表達載體的構建方法，其特征在于包括下列步驟：

1）合成如SEQ?ID?No.1所示的yDsRed序列，

2）將上述合成的yDsRed序列用BamH?I和Sal?I進行雙酶切，然后與pUC57載體相連得到pUC57/yDsRed；

3）以pYestrp2載體為基本框架，通過PCR方法從酵母基因組擴增酵母強啟動子GPD，并經Swa?I和BamH?I雙酶切，將其插入到pYestrp2載體中，構建成GPD驅動的酵母表達載體pGPD；

4）用BamH?I和Not?I對pUC57/yDsRed酶切，常規回收yDsRed目的片段，將其插入到pGPD的相應酶切位點，構建成紅色熒光蛋白酵母表達載體pGPD/yDsRed。