[發明專利]一種人用預防狂犬病和破傷風的疫苗

有效

• 申請號: 201210137897.3
• 申請日: 2012-05-07
• 公開（公告）號: CN102671194A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 蔡勇;侯文禮;鐘澤榮;馮曉
• 申請（專利權）人: 成都康華生物制品有限公司
• 主分類號: A61K39/295
• 分類號: A61K39/295;A61K39/205;A61K39/08;A61P31/04;A61P31/14;C12N7/00;C12R1/93
• 代理公司: 成都華典專利事務所(普通合伙) 51223
• 代理人: 徐豐;楊保剛

1.一種人用預防狂犬病和破傷風的疫苗，其特征在于：其由狂犬疫苗和破傷風類毒素組成，所述狂犬疫苗由人用二倍體細胞WI-38接種CDKHBP-1毒株純化得到。

2.根據權利要求1所述的一種人用預防狂犬病和破傷風的疫苗，其特征在于：所述破傷風類毒素的量為5～9LF/劑。

3.根據權利要求1所述的一種人用預防狂犬病和破傷風的疫苗，其特征在于：所述狂犬疫苗由以下方法制得：

1)??人二倍體細胞的復蘇、擴增培養；

2)??在人二倍體細胞上接種CDKHBP-1毒株；

3)??收獲病毒液，滅活、濃縮；

4)??純化。

4.根據權利要求3所述的一種人用預防狂犬病和破傷風的疫苗，其特征在于：所述純化包括以下步驟：

1)??超濾純化；

2)??蔗糖密度區帶離心；

3???Sepharose4FF柱層析純化；

4)??佐劑吸附，加保護劑人血白蛋白。

5.根據權利要求3所述的一種人用預防狂犬病和破傷風的疫苗，其特征在于：步驟1）中細胞培養液為199培養液，且該細胞培養液中含牛血清的體積分數為2～10%、卡那霉素或慶大霉素26～30U/ml，并調pH至7.0～7.5，其培養溫度為35～37℃，擴增培養方式為轉瓶培養、細胞工廠培養、微載體反應器培養中的一種。

6.根據權利要求3所述的一種人用預防狂犬病和破傷風的疫苗，其特征在于：滅活采用?-丙內酯滅活，用截留10萬～30萬的超濾器濃縮疫苗，濃縮至20倍以上。

7.根據權利要求4所述的一種人用預防狂犬病和破傷風的疫苗，其特征在于：?所述純化的具體方法為：加入適量的PBS沖洗，再濃縮到原倍數，再加入適量的PBS沖洗反復6～7次；再經過蔗糖密度梯度離心，用38%和45%（W/W)的蔗糖密度梯度，21000～24000rpm超速離心4小時，經紫外吸收峰的抗原含量，蛋白濃度的分析，確定病毒所在位置，再經Sepharose4FF柱層析純化。

8.根據權利要求4所述的一種人用預防狂犬病和破傷風的疫苗，其特征在于：所述佐劑為納米氫氧化鋁。